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100
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西格
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血清、血浆或其他相关生物液体
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48T/96T
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文献和实验可以分析半衰期小于10min的瞬时增强子、反义和启动子相关的RNA,此外也可以确定转录终止位点。 SLAM-seq 优点:无需免疫共沉淀或生物素分离导致的结果的偏差,操作简单,RNA input量少;可结合Quantseq 3’mRNA建库试剂盒使用,节省大量的测序空间,大大节约测序成本。 相对于其他的方法,SLAM-seq(图3)表现超强的优势,无需繁琐且技术要求苛刻的免疫共沉淀或生物素分离等操作,操作简单,RNA
的Sanger研究所主办,并对公众开放。(http://microrna.sanger.ac.uk/) Biogenesis(起源): miRNAs起源于内源性表达转录本,是长约21-25nt的双链RNA分子,其典型特征是具有发卡结构。图1表述了对当前miRNA和siRNA起源的理解。miRNA途径开始于一个miRNA基因的pri-miRNA(Primary miRNA)转录本(step 1);这个70-100nt的发卡RNAs(pri-miRNA)在核内被核糖核酸酶Drosha加工处理而最终成为pre
钒核糖核苷复合物:由氧化钒离子和核苷形成的复合物,它和RNA酶结合形成过渡态类物质,几乎能完全抑制RNA酶的活性。4. RNA酶的蛋白抑制剂(RNasin):从大鼠肝或人胎盘中提取得来的酸性糖蛋白。RNasin是RNA酶的一种非竞争性抑制剂,可以和多种RNA酶结合,使其失活。5. 其它:SDS、尿素、硅藻土等对RNA酶也有一定抑制作用。因为DEPc不加选择的修饰蛋白质和RNA,因此在分离和纯化RNA过程中不能使用,而且它与一些缓冲液(例如Tri)不能相容。在所有RNA实验中,最关键的因素是分离得到
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