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- 英文名:
Ethidium Bromide Solution (10 mg/ml)
- 保质期:
三年
- 供应商:
上海科渊生物技术有限公司
- 保存条件:
+4℃
- 规格:
10 ml
注:
- 溴化乙锭溶液(0.44mg/ml)1 滴的体积为 45μl。
- 如果所需浓度不在上表中,请去掉喷嘴,用微量移液器取适量并稀
释至所需浓度。 - 需要调节大体积溴化乙锭溶液时,请使用使用溴化乙锭溶液(10mg/ml)(货号 14631-94)
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文献和实验用缓冲液补充。 (4) 使溶液冷却至60℃。加入溴化乙锭(用水配制成10mg/ml的贮存液)到终浓度为0.5ug/ml,充分混匀。 (5) 用移液器吸取少量琼脂糖溶液封固胶模边缘,凝固后,在距离底板0.5-10mm的位置上放置梳子,以便加入琼脂糖后可以形成完好的加样孔。如果梳子距玻璃板太近,则拔出梳子时孔底将有破裂的危险,破裂后会使样品从玻璃板之间渗透。 (6)将剩余的温热琼脂糖溶液倒入胶模中。凝胶的厚度在3-5mm之间。检查一下梳子的齿下或齿间是否有气泡
,此时可见白色絮状沉淀,此即DNA粗制品。 5.用玻棒捞起DNA沉淀,放入小烧杯中,用70%乙醇洗涤沉淀一次,洗涤时动作要轻,防止DNA被切断。 6.沉淀取出放入一干净的塑料离心管中,用lmlTE缓冲液溶解。 7.在lmlDNA溶液中加入10mg/ml的RNA酶20μl,使最终浓度达到200μg/ml,37℃保温30分钟。 8.加入20%SDS25μl,使最终浓度至0.5%;加入0.5mol/l EDTA30μl至20mmol/l;加10mg/ml蛋白酶K20μl,使最终浓度为200μg/ml,50
dye) 0.25%溴酚蓝 0.25%二甲苯青 40%(W/V)蔗糖 (6)溴化乙锭(EB) 10mg/ml (7)琼脂糖agarose(电泳级) (8)DNA分子量标记物:Lambda HindⅢ DNA markers 3. 仪器设备和消耗品 电泳仪、电泳槽、样品梳、微波炉、水浴锅、移液器(10μl,200μl,1000μl)、离心管、一次性枪头(200μl,1000μl)。 四. 实验步骤 1. DNA样品的制备 采集生物检测样本,在弱碱和螯合剂存在条件下进行组织










