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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
21
- 英文名:
Radix euphorbiae pekinensis
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
产品名称:京大戟LAMP鉴定试剂盒说明书
英文名称:Radix euphorbiae pekinensis
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
女贞苷(标准品) Ligustroflavone 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA检测试剂盒HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit 96T/48T
夏佛塔苷(标准品) Schaftoside 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)试剂盒 Rat plasminogen activator inhibitor ,PAI ELISA Kit
二氢小檗碱(标准品) 9,10-Dimethoxy-2,3-(methylenedioxy)-13,13a-didehydrob 质量规格:HPLC≥98%,标准品 英文名称RatangiotensinogenELISAKit大鼠血管紧张素原(aGT)规格:96T/48T
桔红素;桔皮素(标准品) Tangeretin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 果菜抗坏血酸比色法定量检测试剂盒20
桔红素;桔皮素 Tangeretin 质量规格:HPLC≥98%,BR ELISAKitFA人叶酸规格:48T/96T
硫酸小檗碱(标准品) Berberine hydrogen sulphate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒 ,英文名: MMP-3 ELISA Kit
噻嗪二酮(标准品) Xanthiazone 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA检测试剂盒RatproteinkinaseB,PKBELISAKit 96T/48T
噻嗪二酮苷(标准品) Xanthiside 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人肠三叶因子(ITF)试剂盒 Human Iestinal efoil factor,ITF ELISA Kit
多被银莲花皂苷R8(标准品) Raddeanoside R8 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Ratthrombieceptor,ELISAKit大鼠凝血酶受体()ELISA试剂盒规格:96T/48T
虎掌草皂甙D(标准品) 无 质量规格:HPLC≥98%,标准品 LAMBDA噬菌体培养试剂盒10
京大戟LAMP鉴定试剂盒说明书丹叶大黄素'O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg RatclusterOfdiffereiation,CD44ELISAKit大鼠CD44分子(CD44)ELISA试剂盒规格:96T/48T
戈米辛O HPLC≥98% 20mg RatclusterOfdiffereiation,CD44ELISA试剂盒大鼠CD44分子(CD44)ELISA试剂盒规格:96T/48T
OβD芹糖獐芽菜苷 HPLC≥95% 20mg RatClusterofdiffereiation3,CD3ELISAKit大鼠CD3分子(CD3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
续断苷A HPLC≥95% 20mg RatClusterofdiffereiation3,CD3ELISA试剂盒大鼠CD3分子(CD3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
续断苷B HPLC≥95% 20mg RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit大鼠CD30分子(CD30)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二氢大豆苷 HPLC≥95% 20mg RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISA试剂盒大鼠CD30分子(CD30)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氧化表小檗碱 HPLC≥95% 20mg Ratclusterofdiffereiation8,CD8ELISAKit大鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒规格:96T/48T
宝藿苷V HPLC≥98% 20mg Ratclusterofdiffereiation8,CD8ELISA试剂盒大鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒规格:96T/48T
宝藿苷VII HPLC≥98% 20mg RatcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
槐黄醇 HPLC≥98% 20mg RatcoagulationfactorⅡ,FⅡELISA试剂盒大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
RatClusterin,CLUELISA试剂盒大鼠凝聚素(CLU)ELISA试剂盒规格:96T/48T 灵芝内酯B HPLC≥98% 20mg
RatclusterOfdiffereiation,CD44大鼠CD44分子(CD44)ELISA试剂盒规格:96T/48T 丹叶大黄素'O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg
RatclusterOfdiffereiation,CD44ELISA试剂盒大鼠CD44分子(CD44)ELISA试剂盒规格:96T/48T 戈米辛O HPLC≥98% 20mg
RatClusterofdiffereiation3,CD3大鼠CD3分子(CD3)ELISA试剂盒规格:96T/48T OβD芹糖獐芽菜苷 HPLC≥95% 20mg
RatClusterofdiffereiation3,CD3ELISA试剂盒大鼠CD3分子(CD3)ELISA试剂盒规格:96T/48T 续断苷A HPLC≥95% 20mg
RatClusterofdiffereiation30,CD30大鼠CD30分子(CD30)ELISA试剂盒规格:96T/48T 续断苷B HPLC≥95% 20mg
RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISA试剂盒大鼠CD30分子(CD30)ELISA试剂盒规格:96T/48T 二氢大豆苷 HPLC≥95% 20mg
Ratclusterofdiffereiation8,CD8大鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氧化表小檗碱 HPLC≥95% 20mg
Ratclusterofdiffereiation8,CD8ELISA试剂盒大鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒规格:96T/48T 宝藿苷V HPLC≥98% 20mg
RatcoagulationfactorⅡ,FⅡ大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 宝藿苷VII HPLC≥98% 20mg
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
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文献和实验长度可达 20kb,适合于各种 GC 含量的扩增,可用于多种样本的直接 PCR 如植物叶片、全血等。且扩增仅需 30s/kb,甚至于 2kb/s。如此卓越,爱不释手了吧? 4. 选择直接扩增试剂盒对粗品扩增 vazyme 生产的各种直扩试剂盒,直接对粗品进行扩增,大大减少了实验的工作周期。如小鼠基因型鉴定可以直接使用 One Step Mouse Genotyping Kit,全血扩增可以直接使用 Blood Direct PCR Kit V2。
诊断中是不需要特殊仪器的,但临床使用的成品试剂盒有赖于和国内拥有毒株的老师合作开发针对中国国情的疾病LAMP引物,在研发过程中由于涉及引物的选择,引物浓度的调整,及反应温度和时间的优化,需要用一种量化的方式去帮助研究者分析选择数据,因此我们推荐用荣研公司的专利产品LA-320C实时基因扩增仪。 3. 操作的便捷性 LAMP方法较其他基因诊断方法,其最大的优势就在于操作的简便性及对仪器设备和人员要求低。LAMP操作步骤少,只需按照说明书要求将反应液、酶、引物和模板按照规定的量加入PCR
按照TaKaRa的说明书,我用了Cool Start法,就是所有操作和试剂都是放在冰上进行的,据说能够减少非特异性。我当时担心目的基因量不够,所以P了两管,分到四个孔跑胶回收的。胶回收用的是OMEGA的试剂盒。 切胶回收之后测得目的片段浓度大概为20 ng/ul。按照TaKaRa的pMD18T说明书的要求,pMD18T需要加入1 ul,而目的片段需要0.1 pmol-0.3 pmol,换算一下,需要的目的片段的量大概为0.1*1800*325=58500 pg=58.5 ng到0.3*1800
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