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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
53
- 英文名:
Rhizoma ligustici
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
英文名称:Rhizoma ligustici
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
吡嗪酰胺(标准品) Pyrazinamide 质量规格:含量测定 SheepIerleukin2,IL-2ELISA试剂盒绵羊白介素2(IL-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
盐酸地美环素;去甲基金霉素 Demeclocycline hydrochloride 质量规格:>900μg/mg,BR 小鼠巯基酸硫转移酶(MPST)ELISA试剂盒 ,英文名: MPST ELISA Kit
盐酸地美环素;去甲基金霉素(标准品) Demeclocycline hydrochloride 质量规格:效价测定,标准品 猪血管生成素1(ANG-1)ELISA检测试剂盒PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 96T/48T
甲基帕罗西汀 N-Methyl Paroxetine 质量规格:>99% 大鼠坏死因子(配体)超家族成员14(TNFSF14)试剂盒 Rat tumor necrosis factor(ligand)superfamily, member 14,TNFSF14 ELISA kit
硫酸头孢喹诺 Cefquinome sulfate 质量规格:干品Cefquinome>80%,BR 英文名称HumanAIL(h)ELISAKIT人AIL规格:96T/48T
头孢噻呋钠 Ceftiofur Sodium 质量规格:>98%,BR,可用于细胞培养 动物组织钙镁ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20
头孢噻呋钠(标准品) Ceftiofur Sodium 质量规格:含量测定 SheepIerleukin6,IL-6ELISA试剂盒绵羊白介素6(IL-6)ELISA试剂盒规格:96T/48T
5'-三胞苷二钠盐(二水) Cytidine-5'-triphosphate(CTP) disodium salt dihydrate 质量规格:>97%,分子生物学级 小鼠氢/离子交换ATP酶β肽(ATP4β)ELISA试剂盒 ,英文名: ATP4β ELISA Kit
伏格列波糖 Voglibose 质量规格:>99%,BR 猪血管生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA检测试剂盒Porcineangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 96T/48T
伏格列波糖(标准品) Voglibose 质量规格:HPLC>99%,标准品 大鼠中性粒细胞趋化因子(CINC)试剂盒 Rat cytokine-induced neuophil chemoatacta,CINC ELISA Kit
藁本探针法PCR鉴定试剂盒说明书氯化飞燕草素,O二葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCyclin-D2ELISAKit大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氯化失车菊素,O双葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCyclin-D2ELISA试剂盒大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二氢葫芦素B HPLC≥95% 20mg RatCyclin-D3ELISAKit大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
葫芦素B OBetaD葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCyclin-D3ELISA试剂盒大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
甲基新苦木素 HPLC≥95% 20mg RatCyclosporineA,CsAELISAKit大鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
,二去氢隐丹参酮 HPLC≥95% 20mg RatCyclosporineA,CsAELISA试剂盒大鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
丹参二醇A HPLC≥95% 20mg RatCystatinC,Cys-CELISAKit大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T
丹参二醇B HPLC≥95% 20mg RatCystatinC,Cys-CELISA试剂盒大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T
丹参二醇C HPLC≥95% 20mg RatCytochrome-C,Cyt-CELISAKit大鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T
丹参酸甲酯 HPLC≥95% 20mg RatCytochrome-C,Cyt-CELISA试剂盒大鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T
RatCyclin-D1ELISA试剂盒大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氯化飞燕草素O芸香糖苷 HPLC≥95% 20mg
RatCyclin-D2大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氯化飞燕草素,O二葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg
RatCyclin-D2ELISA试剂盒大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氯化失车菊素,O双葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg
RatCyclin-D3大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒规格:96T/48T 二氢葫芦素B HPLC≥95% 20mg
RatCyclin-D3ELISA试剂盒大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒规格:96T/48T 葫芦素B OBetaD葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg
RatCyclosporineA,CsA大鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 甲基新苦木素 HPLC≥95% 20mg
RatCyclosporineA,CsAELISA试剂盒大鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒规格:96T/48T ,二去氢隐丹参酮 HPLC≥95% 20mg
RatCystatinC,Cys-C大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T 丹参二醇A HPLC≥95% 20mg
RatCystatinC,Cys-CELISA试剂盒大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T 丹参二醇B HPLC≥95% 20mg
RatCytochrome-C,Cyt-C大鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T 丹参二醇C HPLC≥95% 20mg
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
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文献和实验gene99 美国KAPA的 一步法的RT-PCR试剂盒说明书见附件!或者是染料法 探针法的荧光定量试剂盒。不知道您具体是需要什么 可以加我Q:512580331 把说明书及我这边做的对比实验的图发给你。 qisanni05 十分感谢!我的QQ号:546483973,能不能麻烦您把您的说明书及您做的对比试验结果发我QQ邮箱里,谢谢! king19890405 我也想知道啊,感谢回答 本文由丁香
这两个条件我们才可以选择快速反应模式。而 Standard Mode 和 Fast Mode 的主要区别在于不同模式下仪器升降温速率不同,快速模式下升降温速度更快。下图列举了当前部分用于基因表达和基因分型的 Master Mix 所支持的反应模式,供大家参考(图 4)。另外针对当前使用较为广泛的体外诊断试剂盒,如新冠检测试剂盒,大家在运行模式选择时需要根据试剂盒说明书做相应的设置,保证实验设置与试剂盒说明书一致。 图 4 常见基因表达和基因分型 master mix 支持反应模式整理
如果您的样本是组织,取样的过程非常重要。组织内部是有内源性 RNase 存在的,组织离体后内源性 RNase 则开始发挥作用,RNA 产生降解。所以离体的组织必须立马放在液氮中速冻,之后转移至 -80℃ 长期保存,且避免反复冻融。研磨组织的过程中需要保证在液氮环境中研磨。RNA 提取的过程中,保证样本的上样量不超过提取试剂盒说明书中规定的最大上样量,上样量过多,同样会造成 RNA 降解。 ②如果您的样本是细胞,则样本搜集过程要简单的多了,只要保证细胞状态良好(细胞状态差也容易造成提取的 RNA 降解
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