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- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
51
- 英文名：
Seman platycladi
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称：柏子仁染料法PCR鉴定试剂盒说明书
英文名称：Seman platycladi
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
硫酸软骨素 HPLC≥98% 20mg 小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 ，英文名： Lp-α ELISA Kit
硫酸小檗碱 HPLC≥98% 20mg 小鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA检测试剂盒MouseoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 96T/48T
硫辛酸 HPLC≥98% 20mg 人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)试剂盒 Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit
柳穿鱼黄素 HPLC≥98% 20mg rataldosterone,ALDELISAKit大鼠固同(ALD)ELISA试剂盒规格：96T/48T
龙胆苦苷 HPLC≥98% 20mg 载玻片细胞βCOLLAGENII蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
龙胆山酮酚 HPLC≥98% 10mg Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISA试剂盒小鼠6同前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
龙胆酸 HPLC≥98% 20mg 小鼠脂蛋白a(Lpa)ELISA试剂盒 ，英文名： Lpa ELISA Kit
龙血素A HPLC≥98% 20mg 猴抗肝细胞膜抗体(LMA)ELISA检测试剂盒Monkeyai-livercellmembraneaibody,LMAELISAKit 96T/48T
龙血素B HPLC≥98% 20mg 犬凝聚素(CLU)试剂盒 Dog clusterin,CLU ELISA Kit
龙血素C HPLC≥98% 20mg 英文名称HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP2ELISAKIT人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)规格：96T/48T
柏子仁染料法PCR鉴定试剂盒说明书异甘草苷 HPLC≥98% 20mg JNK/SAPK(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
异甘草素 HPLC≥98% 20mg JNK/SAPK蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
异钩藤碱 HPLC≥98% 20mg JNK/SAPK蛋白共沉淀分析试剂盒5
异古伦宾 HPLC≥98% 20mg Karnovsky固着液50毫升
异荭草苷 HPLC≥98% 20mg K-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒6
异槲皮苷 HPLC≥98% 20mg KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2
异黄腐醇 HPLC≥98% 20mg LAMBDA噬菌体DNA分离试剂盒10
异黄芪皂苷I HPLC≥98% 10mg LAMBDA噬菌体DNA氯化铯化试剂盒10
异黄芪皂苷II HPLC≥98% 10mg LAMBDA噬菌体DNA树脂化试剂盒10
异茴芹内酯 HPLC≥98% 20mg LAMBDA噬菌体培养试剂盒10
JNK/SAPK(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 异甘草苷 HPLC≥98% 20mg
JNK/SAPK蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25 异甘草素 HPLC≥98% 20mg
JNK/SAPK蛋白共沉淀分析试剂盒5 异钩藤碱 HPLC≥98% 20mg
Karnovsky固着液50毫升 异古伦宾 HPLC≥98% 20mg
K-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒6 异荭草苷 HPLC≥98% 20mg
KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2 异槲皮苷 HPLC≥98% 20mg
LAMBDA噬菌体DNA分离试剂盒10 异黄腐醇 HPLC≥98% 20mg
LAMBDA噬菌体DNA氯化铯化试剂盒10 异黄芪皂苷I HPLC≥98% 10mg
LAMBDA噬菌体DNA树脂化试剂盒10 异黄芪皂苷II HPLC≥98% 10mg
LAMBDA噬菌体培养试剂盒10 异茴芹内酯 HPLC≥98% 20mg
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称：柏子仁染料法PCR鉴定试剂盒说明书
英文名称：Seman platycladi
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
硫酸软骨素 HPLC≥98% 20mg 小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 ，英文名： Lp-α ELISA Kit
硫酸小檗碱 HPLC≥98% 20mg 小鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA检测试剂盒MouseoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 96T/48T
硫辛酸 HPLC≥98% 20mg 人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)试剂盒 Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit
柳穿鱼黄素 HPLC≥98% 20mg rataldosterone,ALDELISAKit大鼠固同(ALD)ELISA试剂盒规格：96T/48T
龙胆苦苷 HPLC≥98% 20mg 载玻片细胞βCOLLAGENII蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
龙胆山酮酚 HPLC≥98% 10mg Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISA试剂盒小鼠6同前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
龙胆酸 HPLC≥98% 20mg 小鼠脂蛋白a(Lpa)ELISA试剂盒 ，英文名： Lpa ELISA Kit
龙血素A HPLC≥98% 20mg 猴抗肝细胞膜抗体(LMA)ELISA检测试剂盒Monkeyai-livercellmembraneaibody,LMAELISAKit 96T/48T
龙血素B HPLC≥98% 20mg 犬凝聚素(CLU)试剂盒 Dog clusterin,CLU ELISA Kit
龙血素C HPLC≥98% 20mg 英文名称HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP2ELISAKIT人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)规格：96T/48T
柏子仁染料法PCR鉴定试剂盒说明书异甘草苷 HPLC≥98% 20mg JNK/SAPK(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
异甘草素 HPLC≥98% 20mg JNK/SAPK蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
异钩藤碱 HPLC≥98% 20mg JNK/SAPK蛋白共沉淀分析试剂盒5
异古伦宾 HPLC≥98% 20mg Karnovsky固着液50毫升
异荭草苷 HPLC≥98% 20mg K-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒6
异槲皮苷 HPLC≥98% 20mg KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2
异黄腐醇 HPLC≥98% 20mg LAMBDA噬菌体DNA分离试剂盒10
异黄芪皂苷I HPLC≥98% 10mg LAMBDA噬菌体DNA氯化铯化试剂盒10
异黄芪皂苷II HPLC≥98% 10mg LAMBDA噬菌体DNA树脂化试剂盒10
异茴芹内酯 HPLC≥98% 20mg LAMBDA噬菌体培养试剂盒10
JNK/SAPK(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 异甘草苷 HPLC≥98% 20mg
JNK/SAPK蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25 异甘草素 HPLC≥98% 20mg
JNK/SAPK蛋白共沉淀分析试剂盒5 异钩藤碱 HPLC≥98% 20mg
Karnovsky固着液50毫升 异古伦宾 HPLC≥98% 20mg
K-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒6 异荭草苷 HPLC≥98% 20mg
KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2 异槲皮苷 HPLC≥98% 20mg
LAMBDA噬菌体DNA分离试剂盒10 异黄腐醇 HPLC≥98% 20mg
LAMBDA噬菌体DNA氯化铯化试剂盒10 异黄芪皂苷I HPLC≥98% 10mg
LAMBDA噬菌体DNA树脂化试剂盒10 异黄芪皂苷II HPLC≥98% 10mg
LAMBDA噬菌体培养试剂盒10 异茴芹内酯 HPLC≥98% 20mg
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文献和实验相关实验
这两个条件我们才可以选择快速反应模式。而 Standard Mode 和 Fast Mode 的主要区别在于不同模式下仪器升降温速率不同，快速模式下升降温速度更快。下图列举了当前部分用于基因表达和基因分型的 Master Mix 所支持的反应模式，供大家参考（图 4）。另外针对当前使用较为广泛的体外诊断试剂盒，如新冠检测试剂盒，大家在运行模式选择时需要根据试剂盒说明书做相应的设置，保证实验设置与试剂盒说明书一致。 图 4 常见基因表达和基因分型 master mix 支持反应模式整理
或存放不当：质粒提取试剂盒成分复杂且保存条件不同，有的试剂还容易出现浑浊。在使用之前需要检查试剂是否保存得当，如果出现浑浊，可参考试剂盒说明书，进行 37℃ 温浴至溶液澄清，再冷却至室温使用。 ⑦洗脱液体积不合适：洗脱液使用体积过大会导致提取浓度偏低，过小会导致洗脱不充分，产量过低。建议参考试剂盒说明书来确定洗脱体积，如果洗脱浓度偏低，可以重复洗脱一次； ⑧洗脱液未添加到硅胶膜中心：可能会导致洗脱液覆盖不完全，导致洗脱效率降低。此外洗脱液可以使用碱性洗脱缓冲液或者无核酸酶的水，避免使用 PH＜
按照TaKaRa的说明书，我用了Cool Start法，就是所有操作和试剂都是放在冰上进行的，据说能够减少非特异性。我当时担心目的基因量不够，所以P了两管，分到四个孔跑胶回收的。胶回收用的是OMEGA的试剂盒。 切胶回收之后测得目的片段浓度大概为20 ng/ul。按照TaKaRa的pMD18T说明书的要求，pMD18T需要加入1 ul，而目的片段需要0.1 pmol-0.3 pmol，换算一下，需要的目的片段的量大概为0.1*1800*325=58500 pg=58.5 ng到0.3*1800
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
柏子仁染料法PCR鉴定试剂盒说明书
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