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- 百奥莱博
- GS2101-FGW
- 北京
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
KpnI
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1.2kU
特别提示：包括KpnI内切酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：KpnI内切酶
英文名称：KpnI
产品货号：GS2101
产品规格：1.2kU
储存条件：冷冻（-20℃）
概述
该限制性内切酶识别5′-GGTAC↑C-3′的酶切位点，并在KpnI缓冲液中具有最佳活性。
特点
- 所有内切酶在最适缓冲液及统一缓冲液中均具有100%活性；缓冲液与下游实验应用100%兼容。
应用
酶切
使用说明
高酶浓度可能导致星活性。由于酶的星活性的影响，不能与BSA长时间孵育。为了获得100％的活性，应将BSA加入到1X反应混合物中至最终浓度为100μg/ml。
组份
1.2KU/管KpnI，10X KpnI Buffer,10X Single buffer
技术规格
| 识别位点 | 5′-GGTAC↑C-3′ |
| 来源 | 携带来自肺炎克雷伯杆菌的kpnIR克隆基因的重组大肠杆菌 |
| 最适缓冲液 | 10X Kpn I buffer(100mMTris-HCl（pH 7.5，37℃），100mMMgCl2，0.2%Triton X-100，1mg/mL BSA) |
| 通用缓冲液 | 10X Single buffer |
| 孵育 | 37℃ |
| 酶活定义 | 1U酶是在1h，37℃，总反应体积为50μl时水解1 μg λDNA所需的酶 |
| 储存 | -20℃ |
| 储存条件 | 10 mM Tris-HCl（pH 7.5，25℃)，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，0.2 mg/mL BSA，50%甘油 |
| 连接与重切 | 经酶切10倍以上后，95%的DNA片段可以连接并重新结合 |
| 甲基化影响 | dam甲基化不敏感，dcm甲基化不敏感，CpG甲基化不敏感 |
| 热失活 | 在80℃加热20分钟失去活性 |
我公司销售的KpnI内切酶北京价格，KpnI限制性内切酶质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增，得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小，然后通过胶回收，获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基，回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒：将原始的质粒载体，比如 pcDNA3.1 质粒，选择合适的酶切位点，比如 NheI/KpnI 进行酶切，获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul，试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时，或适当延长时间，保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增，得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小，然后通过胶回收，获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基，回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒：将原始的质粒载体，比如 pcDNA3.1 质粒，选择合适的酶切位点，比如 NheI/KpnI 进行酶切，获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul，试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时，或适当延长时间，保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)（BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等） 在分子克隆实验中，限制性内切酶是必不可少的工具酶。 无论是构建克隆载体还是表达载体，要根据载体选择合适的内切酶（当然，使用T载就不必考虑了）。先将引物设计好，然后添加酶切识别序列到引物5' 端。常用的内切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI
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