HighDef® IHC chromogen substra

组化染色背景高？没信号？一篇文章带你快速掌握免疫组化！

素与生物素高度特异性结合的关系来放大免疫组化信号，但此方法有产生内源性生物素背景的可能性。而酶标聚合物法，利用聚合物与二抗结合，形成聚合物-二抗复合物，实现信号放大，该方法不受内源性生物素的干扰。 表 2 免疫组化多种检测系统分类 图 2 酶标聚合物法检测系统 图 3 链霉亲和素-生物素法检测系统 在显色法中，针对 HRP（辣根过氧化物酶）显色系统，其常用底物为DAB/AEC（HRP/DAB 呈棕褐色染色，具有很好的光稳定性，HRP/AEC 呈红色染色，在阳光下会褪色，不易保存。 基础 IHC

免疫组化的操作步骤

并储存在不透明的小瓶中。） 12 ．缓冲液洗 5min/2 次。 13 ．向 1ml DAB Plus Substrate ( 或 AEC Plus Substrate) 中滴加 1-2 滴 DAB Plus Chromogen （或 AEC Plus Chromogen ） , 混匀后滴加到切片上，孵育 3 － 15 分钟。（具体时间由染色深浅决定。） 14 ．自来水充分冲洗 , 复染，脱水 , 透明

手把手课程之 IHC 关键操作步骤

的染色强度。获得合适的染色强度后，将载玻片置于蒸馏水 (dH2O) 中以阻止进一步显色。抗体：Phospho–Stat3(Tyr705)(D3A7) XP® Rabbit mAb #9145样本：石蜡包埋的人类乳腺肿瘤显色检测：利用 SignalStain® DAB Substrate Kit #8059（左），竞争者提供的 DAB（中和右）CST 的 IHC/IF 明星产品推荐：生化试剂：Catalog NumberProduct NameProduct