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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃保存
- 保质期:
2年
- 英文名:
PreScript One-Step RT-qPCR SYBR Green Kit
- 库存:
充足
- 供应商:
广州英赞生物科技有限公司
一步法RT-qPCR检测试剂盒(染料法)
【产品概述】
PreScript One-Step RT-qPCR SYBR Green Kit是采用SYBR Green嵌合荧光法进行One Step qRT-PCR反应的专用试剂。使用本制品进行以RNA为模板的RT-qPCR 反应可在同一反应管内连续进行,操作简单,提高检测通量,并能有效防止污染。One Step qRT-PCR由于可以对扩增产物进行实时检测,大大提高了检测灵敏度,非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。
本制品中使用了适合于Real Time RT-PCR 的反转录酶 Prescript Ⅲ RTase 和具有高扩增效率和高扩增特异性的C-SsoRobust Taq DNA Polymerase,能进行稳定的 Real Time One Step RT-PCR 反应。
【产品内容】
| 组分 | S033A | S033B |
| 2× One-Step RT-qPCR Buffer | 1.25 mL× 2 | 1.25 mL× 4 |
| C-SsoRobust Taq DNA Polymerase(5 U/μL) | 100 μL | 200 μL |
| Prescript Ⅲ RT Enzyme Mix | 100 μL | 200 μL |
| RNase Free ddH2O | 1.25 mL× 2 | 1.25 mL× 4 |
【产品优势】
-
特异性强:高性能的热启动C-SsoRobust Taq DNA聚合配以优化后的反应缓冲体系,保证反应的特异性及结果的可靠性。
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灵敏度高:该检测试剂可检测低至1pg的Total RNA模板,且具有科学严谨的扩增效率。
-
操作简便:一管式反应,*大程度减少移液次数,避免操作失误 。
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适用性广:配有校正染料Rox,可适用于需要校正的检测仪器(如Applied Biosystems®Step One Plus TM等)。
【实验案例】
高灵敏度及特异性

将10ng 293T Total RNA进行10倍梯度稀释作为模板,共5个梯度(10ng、1ng、100pg、10pg、1pg)。使用PreScript One-Step RT-qPCR SYBR Green KitRobust及从A公司购买的同类产品,扩增GAPDH基因,结果显示,本产品可轻松检测出所有浓度的待测模板,检测数据具有优异的线性关系,相对于A公司产品具有更好的扩增效率及更高的灵敏度和扩增特异性。
【应用范围】
一步法RT-qPCR、、病毒RNA检测 、食品安全检测等。
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文献和实验SYBR Green Quantitative PCR Protocol
12μl of master mix for each well, plus some excess1 Rxn: 10μl SYBR Green Mix 52 Rxn: 520μl SYBR 0.4μl Forward Primer (10μM stock) 20.8μl F
REAL TIME PCR WITH SYBR GREEN I 建议PROTOCOL
许多工作的。实在不行,如果有MONEY,那就用TAQMAN,买ABI的KIT,那些公司都优化好的,基本可以直接使用,何况SYBR GREEN I的特异性不如TAQMAN,而且如果摸了无数次都不能获得良好的结果,那些花掉的MONEY还不如买现成的,即省钱省时省力,不过就是丧失了从不断的失败痛苦中寻找成功的喜悦了。
步法能够实现包括低丰度RNA 在内的RNA 的定量. 选择Tm 值尽可能小的引物,使PDs 与扩增产物Tm 值之间有足够的差距,将更有利于四步法的应用,并可成功地用于低丰度RNA 的准确定量. 关键词 引物二聚体,荧光实时定量RT-PCR ,SYBR green Ⅰ,四步法,RNA 定量 Elimination of Primer2dimer Effect in SYBR Green Ⅰ Real-time RT-PCR Using 42step Program
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