人外周血B淋巴细胞

人外周血PBMC的制备及注意事项

人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血，用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释，上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中，先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液（1.077 g/mL），再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液，血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注：Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温，温度过高会导致分离不明显，温度过低会导致密度过大，同样分离效果不好， 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移

人外周血单细胞悬液制备流程及注意事项

。如果直接倒掉，离心管内会有残留裂解液，后续加入100 μL PBS重悬细胞时，可能不能完全稀释裂解液，导致红细胞裂解过度。 6. 细胞沉淀重悬，可用枪轻轻吹打，或者用转速小的涡旋仪涡旋。 7. 人血样本建议染CD45，有利于后续数据分析时圈门。 8. 处理人血样本时，推荐设置只染CD45的单染管低速上机用来设置阈值，观察细胞量，圈淋巴细胞群。 9. 人外周血中主要含T淋巴细胞，B淋巴细胞的量较少。如果使用病人的血液样本，B淋巴细胞的量可能更少，因此B淋巴细胞的检测不推荐使用过夜的样本，过夜样本易导致

人外周血中 CD4 T 细胞分选实例

度的功能细胞。二、人外周血中 CD4 T 细胞分选实例1.产品信息： MojoSort™ Human CD4 T Cell Isolation Kit（BioLegend, Cat#480009），阴性分选试剂盒2.检测仪器型号：BD LSRⅡ3.样本：正常人外周血4.分选前后检测相关产品：PE-CD4（Biolegend, Cat# 317410）5.实验过程（1）采血之后采用达优™ 人淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞。分离之后能见到明显的白膜层。（达优，Cat#DKW-KLSH-0100