人肺泡上皮细胞

肺泡上皮细胞的分离

问：我打算检测线粒体膜电位，大鼠肺移植后，如何分离肺泡上皮细胞呢？答：步骤如下：1、取得完全无血液残留的肺脏：实验前将大鼠全身血液放净，取得完全无血液残留的肺脏。2、消化肺组织：常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分离上皮细胞的酶，现在一般用损伤性小的弹性蛋白酶来替代胰蛋白酶。但这种酶却有活性不稳定，有效作用时间短暂，容易自我降解等问题。Dobbs L G等认为弹性蛋白酶能更有选择性的消化分离上皮细胞[9]。胰蛋白酶消化没有选择性，会带来像内皮细胞和间质

分离肺泡上皮细胞的步骤

一、取得完全无血液残留的肺脏： 实验前j将大鼠全身血液放净，取得完全无血液残留的肺脏二、消化肺组织：常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分离上皮细胞的酶，现在一般用损伤性小的弹性蛋白酶来替代胰蛋白酶。但这种酶却有活性不稳定，有效作用时间短暂，容易自我降解等问题。Dobbs L G等认为弹性蛋白酶能更有选择性的消化分离上皮细胞[9]。胰蛋白酶消化没有选择性，会带来像内皮细胞和间质细胞等一些不能在后面的分离步骤中去除的杂质细胞，因此弹性蛋白酶更有助于提高上皮

原代肺泡上皮细胞的体外分离培养

原代 肺泡上皮 细 胞 （ Primary Alveolar Epithelial Cell s ） 的体外分离培养 1 、完全无血液残留肺 脏组织 2、消化肺 组 织 ：常用细胞消化酶：胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。经支气管将酶灌注到完整的肺中消化，或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3 、分离 纯 化 细 胞 ：原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法：（1）密度梯度离心法：密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同，在密度梯度离心中细胞所处的位置也相应不同