人羊膜细胞

PriCells: 正常人羊膜细胞（HAM）原代细胞培养

实验材料：1. 人胎盘；2. PBSA/GASP：含抗生素的PBSA（庆大霉素，50μg/ml；两性霉素B，1.25μg/ml；链霉素100μg/ml；青霉素100U/ml）；3. 丙三醇；4. 含50%丙三醇的DMEM；5. 胰蛋白酶/EDTA；6. Millicell微孔膜组织培养插片；7. 塑料刮片和无菌棉拭子；实验方法：1. 用PBSA/GASP清洗组织；2. 分离人羊膜，用戴手套的手从胎盘上将羊膜钝性分离下来，分离出的羊膜薄层包括上皮细胞，基底膜和一些基质组织；3. 用无菌棉拭子除去

wish细胞的传代

wish细胞是上皮细胞， 人羊膜细胞 ，培养基我用的是最常见的1640（10％小牛血清，加双抗）。1、细胞长满培养瓶时既要传代。我用胰酶和edta的混合液消化。用D-Hank's液配制成0.25%的胰酶。edta的终浓度是0.02%。2、使用前37度预热，每个25ml培养瓶加9滴的胰酶和edta混合液，消化液的量可根据自己培养瓶的大小而定，原则就是能够盖满瓶底。加入胰酶和edta混合液以后，为使酶的活性最大，将培养瓶盖拧紧后放回培养箱中，5分钟左右即用含血清的培养基终止消化。如果在室温情况下消

孵化鸡卵培养法 embryonated egg-culture

培养病毒、立克茨体的方法之一。与使用菌株细胞进行接种的方法一样，多用于制造疫苗方法，是先将病毒接种于活的受精鸡卵，然后放在孵化器中培养。由于病毒种类的不同，孵化时期，接种部位，以及接种后到增殖时所需时间也各不一样。按接种部位的不同，有尿囊浆膜上接种、尿囊腔接种、羊膜腔接种、卵黄囊内接种和鸡胚接种等。病毒可分别在尿囊浆膜的外胚层细胞（痘疮病毒）、内胚层细胞（流行性感冒病毒）、羊膜细胞（流行性感冒病毒、流行性腮腺炎病毒）、鸡胚肺（流行性感冒病毒）、鸡胚脑（脑炎病毒）、卵黄囊细胞（立克茨体