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- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
51
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
产品仅供科研使用特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
产品名称：白斑综合症病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
规格：White Spot Syndrome Virus(WSSV)
分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
注意事项：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
PCR实验外包服务：
PCR起源：荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点：1、封闭反应，无需PCR后处理。2、特异性强，灵敏度高。3、采用对数期分析，摒弃终点数据，定量准确。4、定量范围宽，可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测，结果直观，避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全，缩短时间，提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；
3. 以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；
3. 阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。
白斑综合症病毒探针法荧光定量PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一站式，足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR（PCR 按 30 uL 体系计算），但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂（如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂）。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合，适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组，需从本公司采购 AFLP（EcoRI-TaqI）组合。
3. 各种参数都经过优化，一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间，可重复 性好，误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料（如动物和植物），对于基因组 在 50-500 Mb 的材料（如细菌和真菌）或 50Mb 以下的材料（如质粒，cosmid， BAC，YAC 和 PAC 等），需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物（8 种）AFLP 引物对。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
支气管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)胰蛋白胨Tryptone质量规格：FMB Grade
REG1A Others Cynomolgus 食蟹猴 REG1A / PSPS 人细胞裂解液 (阳性对照) 生物素;D-生物素;维生素 H 辅酶 RD-Biotin质量规格：>98%,BR
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA甘油Glycerol质量规格：>99%,分子生物学级
SK-MES-1细胞，人肺鳞癌细胞 狗肾细胞,MDCK细胞 CM-M066小鼠膀胱成纤维细胞完全培养基100mL柠檬酸钠二水；柠檬酸三钠二水Sodium citrate, trisodium salt, dehydrate质量规格：> 99%,BR
SHZ-88(大鼠癌细胞) 5×106cells/瓶×2明胶Gelatin质量规格：药用级,胶强度 ~240 g Bloom
人虹膜色素上皮细胞RNAHIPEpiC miRNA5 μg表儿茶素没食子酸酯(标准品)(−)-Epicatechin gallate/ECG 质量规格：HPLC≥98%，标准品
LILRA5 Others Rat 大鼠 LILRA5 人细胞裂解液 (阳性对照) 表告依春（标准品）Epigoitrin质量规格：HPLC≥98%，标准品
人心室肌细胞完全培养基 100mL表没食子儿茶素（标准品）(−)-Epigallocatechin/EGC 质量规格：HPLC≥98%，标准品
PC-12细胞，大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化) 22RV1(前列腺癌细胞) 人肝癌细胞;SMMC-7721表小檗碱（标准品）Epiberberine质量规格：HPLC≥98%，标准品
PF4 Protein Human 重组人 CXCL4 / PF4 蛋白滨蒿內酯（标准品）Scoparone质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠结肠癌细胞;CT26.WT [CT26WT]白花前胡乙素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Praeruptorin B
CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人细胞裂解液 (阳性对照) 白术内酯Ⅱ；苍术内酯II（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Atractylenolide II
CM-M013小鼠肺大静脉内皮细胞完全培养基100mL断血流皂苷A（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Clinodiside A
KYSE 150细胞，人食管鳞癌 人神经胶质瘤细胞,U251细胞 兔角膜前基质层成纤维细胞;RCFBF三白草酮（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Sauchinone
CCD-1095Sk(人浸润性导管癌旁皮肤细胞) 5×106cells/瓶×2甘草酸质量规格：UV>98%,BRGlycyrrhizic acid
白斑综合症病毒探针法荧光定量PCR试剂盒狗肾细胞隆突型;MDCK superdome十八醇1克
PANC-1细胞，人胰腺癌细胞 人横纹癌细胞,A673细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;MEF六羰基 ChroMiuM hqxcccrbonyl 1
HO-8910(人卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2dehyde (94.0-100.5%) 500G 通用试剂
Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium(人细胞分离液) 100ml本试剂1米
人成纤维细胞裂解物HMFL(DL-苹果酸)
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验相关实验
荧光定量PCR的应用 分子生物学研究1、核酸定量分析。 对传染性疾病进行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的检测 , 比如近期流行的甲型H1N1流感， 转基因动植物基因拷贝数的检测，RNAi 基因失活率的检测等。2 、基因表达差异分析。 比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 ( 如药物处理、物理处理、化学处理等 ) ，特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA芯片或差显结果的确证3 、SNP 检测。检测单核苷酸多态性对于研究个体对不同疾病的易感性或者个体
实时荧光定量 PCR 技术（Quantitative Real-time PCR，简称 qPCR）是在 PCR 扩增过程中，通过实时监测荧光信号的变化，达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断，动物疾病监测，食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延，qPCR 技术更是因其检测通量高，速度快，操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果，我们需要注意哪些方面呢？其实决定一次实验成功
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
过程，无RNA损失。这就需要裂解液即可迅速裂解细胞，高效的保护RNA，又不会影响高效反转录反应，且对于后续荧光定量PCR无抑制作用。FastLine细胞到cDNA快速制备试剂盒（KR105，TIANGEN），一站式完成从细胞到cDNA的快速制备，同时去除基因组DNA残留，整个操作流程仅需50 min，获得的cDNA不但可以直接进行荧光定量 PCR还可以和正常提取RNA后进行第一链反转录后得到的cDNA一样，冷冻保存供以后使用，是从少量细胞快速制备cDNA的最佳选择，并可实现高通量检测。 图
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