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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
45
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
规格:Theileria parva
产品仅供科研使用分类:探针法荧光定量PCR
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
PCR实验外包服务:
PCR起源:荧光定量PCR(也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点:1、封闭反应,无需PCR后处理。2、特异性强,灵敏度高。3、采用对数期分析,摒弃终点数据,定量准确。4、定量范围宽,可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测,结果直观,避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全,缩短时间,提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct;
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35;
3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性:有明显的指数扩增期,且Ct<38;
2.可疑:有明显的指数扩增期,且38≤Ct<40,此时样本为可疑样本;对于可疑样本建议复核一次,若复核结果Ct<40且有指数扩增期,则判定为阳性,否则判定为阴性;
3. 阴性:无指数扩增期,Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果;
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,可能会导致出现假阴性结果。
小泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒具有下列特点:
1. 一站式,足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 体系计算),但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂(如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂)。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合,适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组,需从本公司采购 AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3. 各种参数都经过优化,一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间,可重复 性好,误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如动物和植物),对于基因组 在 50-500 Mb 的材料(如细菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如质粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 种)AFLP 引物对。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
猪小肠上皮细胞;ZYM-DIEC02正辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))n-Octanoic acid质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人细胞裂解液 (阳性对照) 十八烷(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Octadecane质量规格:Standard for GC, ≥99.5% (GC)
肾癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)/1ml仲辛醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))2-Octanol质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
BS-C-1细胞,非洲绿猴肾细胞 人导管瘤细胞,UACC812细胞 人脑膜细胞裂解物HMCL二十八烷(standard for GC,≥98.5%(GC))Octacosane质量规格:standard for GC,≥98.5%(GC)
猴肾细胞;Vero IgCD4草酸(Standard for GC,≥99.6%)Oxalic acid dihydrate质量规格:Standard for GC,≥99.6%
人成纤维细胞裂解物HLFL氘代盐酸(5g )Deuterium Chloride质量规格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O
EDNRB Others Human 人 EDNRB / Endothelin B Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 氘代盐酸(5g )Deuterium Chloride质量规格:D, 99.5% DCL 35% IN D2O
人癌细胞;MDA-MB-468氘代盐酸(10g)Deuterium Chloride质量规格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-3C3 弹性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL氘代盐酸(10g)Deuterium Chloride质量规格:D, 99.5% DCL 35% IN D2O
SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株 Human氘代盐酸(50g)Deuterium Chloride质量规格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4A章胺盐酸盐;正辛弗林质量规格:>98%DL-Octopamine HCl
OSMR Others Mouse 小鼠 OSMR / IL-31RB 人细胞裂解液 (阳性对照) 舒林酸质量规格:>98%,BRSulindac
KB 人口腔上皮癌细胞舒林酸(标准品)质量规格:>98%,标准品Sulindac
MDA-MB-415人腺癌细胞 MDA-MB-415 human breast adenocarcinoma cells L-15培养基+15%FBS托品酸(标准品)质量规格:>98%Tropic acid
TDGF1 Protein Rat 重组大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 标签)通关藤苷H(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Tenacissoside H
小泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒大鼠肝癌细胞;RH-35Lead(IV)acetate四1克CP,98.5%
SPC-A-1细胞,肺腺癌细胞 人口腔癌细胞,HB细胞 tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1D33,5-二酚;间-5-二本酚; 5-羌基间二本; 队称间二本酚; 1,3-二本-5-酚; 3,5-二本-1-酚; 1,3,5-二本酚; 1-羌基-3,5-二本; 1,3-二基-5-羌基本 3,5-DiMqthylphqnol;3,5-Xylqnol;5-xy7noxy-M-xylqnq; syM-M-Xylqnol;1,3-Xylqn-5-ol;3,5-Xylqn-1-ol;M-5-Xylqnol;1,3,5-Xylqnol;1-xy7noxy-3,5-diMqthylbqnzqnq; 1,3-DiMqthyl-5-xy7noxybqnzqnq;
杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F3IPM十四酸异酯1公斤高,98%
PVRL2 Others Mouse 小鼠 CD112 / PVRL2 人细胞裂解液 (阳性对照) 干酪素shēng huà shì jì容量:100克
人脑微血管内皮细胞裂解物HBMECL≥99%ezepenzene
注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
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文献和实验做 real-time PCR之前,你应该如何着手设计引物?做哪些准备?看完必会!
过,你要先确定你选择哪个方法。如果你想用 Taqman Probe 法,请你选择 primer express 3.0。如果你想用 SYBR 法,我建议你选 primer premier 5.0。 为什么?请往下看。 3)两种引物设计软件之比较。 先说专门为 real-time PCR 定制的 primer express 3.0 。这个软件其实是为 Taqman 探针法设计的,而不适合SYBR染料法。 如果你用探针法,强烈推荐。打开软件就会发现,在方法选择的下拉菜单中
miRNA实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR从1996年美国Applied Biosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来,该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中,成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种:(1)TaqMan荧光探针法:该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时,荧光基团发光被淬灭基团吸收;在PCR扩增过程中,探针被降解,荧光基团与淬灭基团分离,发出可被检测到的荧光,以此来监测整个
实时荧光定量PCR从1996年美国AppliedBiosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来,该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中,成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种:(1)TaqMan荧光探针法:该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时,荧光基团发光被淬灭基团吸收;在PCR扩增过程中,探针被降解,荧光基团与淬灭基团分离,发出可被检测到的荧光,以此来监测整个PCR过程。(2)SYBR荧光染料法:该方法
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