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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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26
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详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
产品名称：泌尿道致病性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
规格：Uropathogenic Escherichia coli(UPEC)
产品仅供科研使用分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
PCR实验外包服务：
PCR起源：荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点：1、封闭反应，无需PCR后处理。2、特异性强，灵敏度高。3、采用对数期分析，摒弃终点数据，定量准确。4、定量范围宽，可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测，结果直观，避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全，缩短时间，提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；
3. 以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；
3. 阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。
泌尿道致病性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一站式，足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR（PCR 按 30 uL 体系计算），但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂（如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂）。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合，适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组，需从本公司采购 AFLP（EcoRI-TaqI）组合。
3. 各种参数都经过优化，一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间，可重复 性好，误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料（如动物和植物），对于基因组 在 50-500 Mb 的材料（如细菌和真菌）或 50Mb 以下的材料（如质粒，cosmid， BAC，YAC 和 PAC 等），需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物（8 种）AFLP 引物对。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
CD63 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人细胞裂解液 (阳性对照) 异甘草素（标准品）Isoliquiritigenin质量规格：HPLC≥98%，标准品
结肠粘膜上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)人参皂苷Re(标准品)Ginsenoside Re质量规格：HPLC≥98%，标准品
MEF-7/Adr细胞，腺癌阿霉素耐药株 人卵巢癌细胞,HOC1细胞 人成纤维细胞裂解物HMFL人参皂苷F4,人参皂苷Rg4Ginsenoside F4质量规格：HPLC≥98%，标准品
恒河猴肾细胞;LLC-MK2人参皂苷RK3(标准品)Ginsenoside RK3质量规格：HPLC≥98%,标准品
ICAM3 Others Human 人 CD50 / ICAM3 人细胞裂解液 (阳性对照) 人参皂苷RH4Ginsenoside RH4质量规格：HPLC≥98%，标准品
B3G2 Others Human 人 B3G2 人细胞裂解液 (阳性对照) 朝藿定A(标准品）Epimedin A质量规格：HPLC≥98%，标准品
人髂动脉内皮细胞完全培养基 100mL朝藿定A1(标准品)Epimedin A1质量规格：HPLC≥98%，标准品
L929细胞，小鼠成纤维细胞 3T3-L1(小鼠脂肪细胞) 小鼠脑瘤细胞;BC3H1朝藿定B（标准品）Epimedin B质量规格：HPLC≥98%，标准品
CSF1 Protein Human 重组人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 标签)朝藿定C（标准品）Epmedin C质量规格：HPLC≥98%，标准品
TF-1(人血液白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠脑瘤细胞;BC3H1橙黄决明素(标准品)Aurantio-obtusin质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠小肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL异牡荆素(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Isovitexin
EC9706人食管癌细胞 Human esophageal cancer cell line EC9706. DMEM+10%FBS异欧前胡素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Isoimperatorin
IL6 Protein Human 重组人 IL6 / Ierleukin-6 蛋白异嗪皮啶(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Isofraxidin
SF763(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 J82(膀胱癌细胞)异去氢钩藤碱（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Isocorynoxeine
CL-0060CHL(仓鼠肺细胞)5×106cells/瓶×2异罗汉果皂苷 V质量规格：HPLC≥98%，标准品isomogroside V
泌尿道致病性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒CL-0352HFF-1(人成纤维细胞)5×106cells/瓶×2多聚嶙酸钠500毫克
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞偶氮二异务晴 2,2'-czodi(2-mqthylbutyronitnilq)
1347-08-7
人胚肺二倍体细胞;HEL-2 人胎盘羊膜细胞完全培养基 100mL十九烷5克
人气管平滑肌细胞RNAHTSMC miRNA5 μg本酸脱羧酶培养基10克RT
CAMK1G Others Human 人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2420-87-33,3’4,4’-联本四羧酸二酐3,3',4,4'-Bipxenyltetracarboxylic dianhydride
注意事项：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
规格：Uropathogenic Escherichia coli(UPEC)
产品仅供科研使用分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
PCR实验外包服务：
PCR起源：荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点：1、封闭反应，无需PCR后处理。2、特异性强，灵敏度高。3、采用对数期分析，摒弃终点数据，定量准确。4、定量范围宽，可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测，结果直观，避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全，缩短时间，提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；
3. 以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；
3. 阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。
泌尿道致病性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一站式，足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR（PCR 按 30 uL 体系计算），但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂（如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂）。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合，适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组，需从本公司采购 AFLP（EcoRI-TaqI）组合。
3. 各种参数都经过优化，一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间，可重复 性好，误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料（如动物和植物），对于基因组 在 50-500 Mb 的材料（如细菌和真菌）或 50Mb 以下的材料（如质粒，cosmid， BAC，YAC 和 PAC 等），需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物（8 种）AFLP 引物对。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
CD63 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人细胞裂解液 (阳性对照) 异甘草素（标准品）Isoliquiritigenin质量规格：HPLC≥98%，标准品
结肠粘膜上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)人参皂苷Re(标准品)Ginsenoside Re质量规格：HPLC≥98%，标准品
MEF-7/Adr细胞，腺癌阿霉素耐药株 人卵巢癌细胞,HOC1细胞 人成纤维细胞裂解物HMFL人参皂苷F4,人参皂苷Rg4Ginsenoside F4质量规格：HPLC≥98%，标准品
恒河猴肾细胞;LLC-MK2人参皂苷RK3(标准品)Ginsenoside RK3质量规格：HPLC≥98%,标准品
ICAM3 Others Human 人 CD50 / ICAM3 人细胞裂解液 (阳性对照) 人参皂苷RH4Ginsenoside RH4质量规格：HPLC≥98%，标准品
B3G2 Others Human 人 B3G2 人细胞裂解液 (阳性对照) 朝藿定A(标准品）Epimedin A质量规格：HPLC≥98%，标准品
人髂动脉内皮细胞完全培养基 100mL朝藿定A1(标准品)Epimedin A1质量规格：HPLC≥98%，标准品
L929细胞，小鼠成纤维细胞 3T3-L1(小鼠脂肪细胞) 小鼠脑瘤细胞;BC3H1朝藿定B（标准品）Epimedin B质量规格：HPLC≥98%，标准品
CSF1 Protein Human 重组人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 标签)朝藿定C（标准品）Epmedin C质量规格：HPLC≥98%，标准品
TF-1(人血液白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠脑瘤细胞;BC3H1橙黄决明素(标准品)Aurantio-obtusin质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠小肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL异牡荆素(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Isovitexin
EC9706人食管癌细胞 Human esophageal cancer cell line EC9706. DMEM+10%FBS异欧前胡素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Isoimperatorin
IL6 Protein Human 重组人 IL6 / Ierleukin-6 蛋白异嗪皮啶(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Isofraxidin
SF763(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 J82(膀胱癌细胞)异去氢钩藤碱（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Isocorynoxeine
CL-0060CHL(仓鼠肺细胞)5×106cells/瓶×2异罗汉果皂苷 V质量规格：HPLC≥98%，标准品isomogroside V
泌尿道致病性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒CL-0352HFF-1(人成纤维细胞)5×106cells/瓶×2多聚嶙酸钠500毫克
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞偶氮二异务晴 2,2'-czodi(2-mqthylbutyronitnilq)
人胚肺二倍体细胞;HEL-2 人胎盘羊膜细胞完全培养基 100mL十九烷5克
人气管平滑肌细胞RNAHTSMC miRNA5 μg本酸脱羧酶培养基10克RT
CAMK1G Others Human 人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2420-87-33,3’4,4’-联本四羧酸二酐3,3',4,4'-Bipxenyltetracarboxylic dianhydride
注意事项：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
过程，无RNA损失。这就需要裂解液即可迅速裂解细胞，高效的保护RNA，又不会影响高效反转录反应，且对于后续荧光定量PCR无抑制作用。FastLine细胞到cDNA快速制备试剂盒（KR105，TIANGEN），一站式完成从细胞到cDNA的快速制备，同时去除基因组DNA残留，整个操作流程仅需50 min，获得的cDNA不但可以直接进行荧光定量 PCR还可以和正常提取RNA后进行第一链反转录后得到的cDNA一样，冷冻保存供以后使用，是从少量细胞快速制备cDNA的最佳选择，并可实现高通量检测。 图
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时，往往出现八叠球菌、乳酸杆菌、芽胞杆菌等。成年人的空肠和回肠上部的细菌很少，甚至无菌，肠道下段细菌逐渐增多。大肠积存有食物残渣，又有合适酸硷度，适于细菌繁殖，菌量占粪便的1/3.大肠中微生物的种类繁多，主要有大肠杆菌、脆弱类杆菌、双歧杆菌、厌氧性球菌等，其他还有乳酸杆菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、变形杆菌、真菌等。 呼吸道的细菌，鼻腔和咽部经常存在葡萄球菌、类白喉杆菌等。在咽喉及扁桃体粘膜上，主要是甲型链球菌和卡他球菌占优势，此外还经常存在着潜在致病性微生物如肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球
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