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- 保存条件:
低温保存
- 英文名:
慢病毒滴度快速检测卡
- 库存:
169
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
100个/包/10个/包
| 规格: | 100个/包 | 产品价格: | ¥5500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10个/包 | 产品价格: | ¥687.0 |
原理
本产品是基于胶体金侧向层析技术的HIV-1 P24蛋白半定量检测卡,可以用于相关慢病毒载体和假病毒包装效率的快速评估。该检测卡的检测下限为1ng/mL,当样品中P24浓度在1ng/mL至500ng/mL时,检测线颜色的深浅与P24浓度呈正相关,通过与比色卡比较,可以半定量待检标本中P24蛋白浓度。
用途
1.基于HIV-1的慢病毒载体包装效率检测:传统的慢病毒包装效率检测的方法有ELISA法(检测P24蛋白含量)和Real-time PCR法(检测核酸拷贝数),这两种方法都耗时费力,且成本高。本产品使用简便,检测时间短,可以随时对转染效果进行评估。如在更换培养基时,吸取样品滴加到试纸上,10-15min后即可判读结果。因此,使用本快速检测试纸,可以快速评估转染效果。
2.基于HIV-1的假病毒包装效率检测:同样含有P24蛋白,在转染后,可以使用本检测卡对包装效果进行快速评估。
图1. 检测卡显色样式
图2. 比色卡
*一个慢病毒颗粒(Lentiviral Particle, LP)中约有2000个P24蛋白分子,用以下公式可以计算慢病毒载体的颗粒数(LP):
一个LP相当于:2000×24×103/(6×1023)g of P24=8×10-5 pg of P24;或者说,1ng P24=1.25×107 LPs(≈1.25×104-5 TU**)
**正常情况下,每100-1000 LPs中会有1个具有感染活性的病毒载体,即1 TU(Transducing Unit)。
注意:上述公式计算得到的LP值是理论值,检测样品中含有的游离的P24蛋白可能会使该值偏高。
提示:通常上清中病毒含量需要超过106 TU/ml,才能确保浓缩纯化后得到足够浓度的慢病毒载体(一般能浓缩150倍左右)。
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文献和实验,再结合表型联合判断。 慢病毒滴度标那么准,有用吗? 为啥细胞用慢病毒一感就死? 为啥细胞用慢病毒感染后会出现小黑点? 很可能是,过感染啦!过感染啦!过感染啦! 有没有先做预实验确定细胞的 MOI?有没有根据病毒滴度准确计算病毒用量? 越是高浓度高纯度的病毒,越是需要精确计算滴度,以避免感染不足或者过量感染,保证最好的细胞状态,以继续下游实验,这样才能省时省力省病毒。 最后,附赠感染预实验步骤详解,请叫我雷锋!
chenguooo 各位大侠,小弟马上要做慢病毒尾静脉注射,想转染肝脏血管内皮细胞,想知道一只BALB/C小鼠要注射多少量?转染效率有多少?查不到类似的文献参考 体内肝脏血管内皮好转吗?我的慢病毒滴度是5*108TU/ML,来自上海英为信公司。 谢谢! zhujoker 慢病毒滴度是5*108TU/ML 打活体滴度太低,效果可能不会好 chenguooo
chenlimei518 请教各位老师们:本人今天上午9:00做慢病毒转染肠癌贴壁细胞(SW620、HCT116),结果今晚6:00去换液观察一下细胞,其中有几个孔细胞死了很多,仅在孔边缘存活几个,有些孔细胞比较多。请老师们帮忙指导。谢谢!具体步骤如下: 慢病毒包装:一、1D接293T细胞于6孔板中,1*10 6/孔 二、2D采用3质粒系统包装,12小时换液(1640+10%FBS) 三、36小时收病毒
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