- ¥1960 - 4700
- 泽叶生物
- ZY427L
- 国产/进口
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit
- 保质期：
二年
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
20polyA+20RT+200qPCR/60polyA+60RT+600qPCR
产品概述
MicroRNA (miRNA)是一类长度为19-23 nt的内源性非编码单链小分子RNA，是一种重要的基因表达调控因子。本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A尾Poly(A)，再使用Oligo(dT)-universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应，生成miRNA对应的cDNA第一链，最后采用miRNA的特异性正向引物和通用反向引物进行特异性的miRNA qPCR检测。该试剂盒能够从单一样品中快速、准确地定量检测miRNA，具有高通量，高灵敏度，高特异性等优点。
产品内容
| 组分 | ZY427S | ZY427L |
| Poly(A) Polymerase（黄色盖） | 20 μL | 60 μL |
| 5× Poly(A) Polymerase Buffer（白色盖） | 40 μL | 120 μL |
| PreScript II Enzyme Mix（绿色盖） | 40 μL | 120 μL |
| 5× PreScript II RT Buffer（红色盖） | 80 μL | 240 μL |
| Universal RTase Primer（透明盖） | 45 μL | 130 μL |
| 2× FQ miRNA SYBR qPCR ProMix（棕色盖） | 1 mL× 2 | 1 mL× 4 |
| mRQ Universal Reverse Primer（透明盖） | 105 μL | 210 μL |
产品优势
高灵敏度：具有宽广的动态变化范围，无需担心样品 量少或miRNA 表达量低而无法精确检测
高特异性：预采用具有茎环结构的通用逆转录引物和高特异的通用qPCR引物，确保检测的特异性
高通量：一次逆转录反应，可检测多个miRNA
实验案例
1. 高灵敏度
将has-mir-144-3P miRNA标准品进行10倍梯度稀释，从1 μM 至10 pM共6个梯度，使用FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit对其进行定量检测 ，并以从A公司购买的同类产品作为对照。结果表明相对于同类产品FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit 具有更低的检测限及更高的灵敏度。
2. 高特异性及高通量
以1 μg X293 Total RNA 为模板，进行加多聚A尾再进行逆转录，将逆转录反应液稀释5倍作为模板，同时检测12种miRNA，每孔添加5 μL。结果表明FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit 可同时检测多种miRNA，且均具有较好的检测特异性，结果可信度高。
应用范围
miRNA定量检测、miRNA表达分析
产品存储
-20℃保存
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文献和实验在反转录前需要进行末端Poly（A）加尾） 2. 茎环状结构的RT引物（ABI产品为主） 由可以自身呈环茎状的特异序列+6到8个miRNA3’端反向互补碱基组成。（一条miRNA序列特异对应一个茎环状结构的RT引物） 三、引物探针设计 由于反转录后得到的cDNA 为（miRNA+RT引物）复合片段。 上游引物可以在miRNA自身序列上找，如果GC含量太低，可以在上游引物5’端加入GCGCC等的保护碱基；下游引物在RT引物的反向互补序列中找；也就是说：上游引物是每个miRNA
【共享】很有用的MIRNA(microRNA)检测实验流程(加polyA法）
来对miRNA 进行检测，具有快速、特异性强、 灵敏度高等优点。 miRNA Q-PCR Detection Kit 通过Poly A Polymerase 对miRNA 3’端进行加“Poly A” 处理，同时利用M-MLV RTase 及独特的Oligo dT Adaptor 对Poly A 化的RNA 进行反转录， 最后采用含有SYBR Green 的AllinOne TM Q-PCR Mix 对miRNA 进行特异性检测。 方法背景介绍：（加Poly A法） 方法特征： 检测简便
子，QIAGEN自有妙招，即便是FFPE组织标本，采用经典的硅胶膜选择吸附离心柱，配上优化好的各种buffer，可以快速纯化出所有大于18个核苷酸的RNA。另外还提供Protocol用于单独富集 第二步是逆转录反应，这里就有别于普通的针对mRNA的RT反应了，因为真核生物mRNA都是有poly-A尾巴的，这样Oligo-dT逆转录引物就很容易结合到mRNA上来合成cDNA了。miRNA就缺了poly-A尾巴，于是QIAGEN的对策就是在RT kit里加了poly(A) polymerase先给那些无poly
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