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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8ºC保存
- 英文名:
QuickAntibody-Mouse2W
- 库存:
14
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
1ml
QuickAntibody-Mouse2W用途
通过2周2针的快速免疫程序快速制备小鼠多克隆抗体,ELISA滴度(Cutoff值为0.1000)可达到1:1000-1:10000或更高。
QuickAntibody-Mouse2W使用方法(详见使用说明书)
1. 备注:推荐使用的抗原用量为(1)免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-5μg;(2)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg;
(3)偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。
2. 充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越。
3. 通过后腿小腿肌肉注射免疫小鼠(视频),每只小鼠左、右腿各注射1针,每针次100μl。
备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。
4. 第14天采微量尾血进行ELISA测定,抗体滴度应达到1:1000-1:10000或更高,随后即可采全血。
QuickAntibody系列免疫佐剂有哪些特点?
与常规使用的弗氏佐剂相比,QuickAntibody免疫佐剂具有免疫周期短、针次少、无需乳化、抗原用量低、抗体滴度高、抗体亲合力高、易获得构象型表位的抗体等多方面优点,详述如下:
1. QuickAntibody只需两针免疫,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,与弗氏佐剂相比可减少免疫针次。
2. QuickAntibody通过减少免疫针次和降低每针次抗原用量,从而可大大节省总抗原用量。推荐使用的抗原用量为(1)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-50μg(通常为小鼠5-20μg,
兔子20-50μg);(2)免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-10μg(通常为小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。
3. QuickAntibody抗体产生快,抗体滴度高,抗体亲合力高。以标准免疫程序为例,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,只需要在三周内进行两针免疫,通常在第五周即可获得ELISA滴
度(Cutoff值为0.1000)高达1:10000-1:10000000的高亲合力抗体水平。
4. QuickAntibody-Mouse2W (2周快速鼠多抗制备佐剂)不破坏抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克隆抗体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。
5. QuickAntibody是一类水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可免疫动物。
6. QuickAntibody使用肌肉免疫途径,与常规小鼠单克隆抗体制备过程中使用足垫免疫或脾内免疫相比,极大方便了使用。
7. QuickAntibody的一个重要用途是可方便地用于制备小鼠多克隆抗体。常规多克隆抗体制备多使用兔子,不但免疫针次多、抗原用量大和抗体产生慢,
而且由于技术要求较高而往往需要委托专门单位制备。使用QuickAntibody免疫佐剂,任何实验动物人员均可方便快速地制备小鼠多克隆抗体,
标准免疫程序只需要简单地免疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克隆抗体。
(强烈推荐使用本佐剂制备小鼠多克隆抗体,1ml高质量的小鼠多克隆抗体足以满足绝大多数用户的实验需求,包括用于酶联免疫、免疫印迹、流式细胞、免疫组化和免疫沉淀等)。
8. QuickAntibody建议常温运输,2~8ºC保存,无菌取用,有效期18个月。
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文献和实验替代弗氏佐剂的新选择——QuickAntibody系列免疫佐剂
周期短?QuickAntibody佐剂有二周快速小鼠多抗制备佐剂、三周快速小鼠单多抗制备佐剂以及五周标准小鼠单多抗制备佐剂三种。若多抗即可满足客户需求,可以建议客户制备小鼠多抗,使用我们的佐剂最快仅需2周即可制备高滴度的小鼠多抗,最慢也只需5周即可制备成功,比常规弗式佐剂8周的制备时间相比,可节省3-6周的时间,从而大大提升了客户实验效率;若客户制备单抗,可以使用我们三周佐剂或五周佐剂,与常规使用弗式佐剂免疫时间8周相比,可以节省3-5周时间,也大大提升了客户实验效率,同时也节省动物饲养成本。 3、抗原用量少?
物来诱导关节炎的发生。 具体操作:8 周龄的雄性 DBA/1 小鼠,在 0d 时腹膜腔注射鼠单克隆 II 型胶原抗体,3d 后腹膜腔注射大肠杆菌脂多糖(LPS)。初次免疫后 d4 有炎症迹象,d6-d8 关节炎达到最严重,出现足踝和足趾明显红肿、炎症细胞浸润和血管翳形成等症状[9-10]。 模型特点:作为 CIA 模型的扩展,CAIA 模型可用于不适合 CIA 的菌株或基因型,并在短时间内快速发病,发病率、可重复性及稳定性较高,但所需试剂昂贵,造模成本偏高。 表 1. 常用诱导型类风湿性关节炎模型比较
1. 杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。2. 单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
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