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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8ºC保存
- 英文名:
QuickAntibody-Mouse3W
- 库存:
13
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
1ml
通过5周2针的标准免疫程序制备小鼠单克隆和多克隆抗体,ELISA滴度(Cutoff值为0.1000)可达到1:10000-1:10000000。
QuickAntibody-Mouse3W使用方法(详见使用说明书)
1.用生理盐水将抗原稀释到2倍终浓度(按每针次50μl用量配制)。
备注:推荐使用的抗原用量为
(1)免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-5μg;
(2)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg;
(3)偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。
2.充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1迅速混匀。
备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越。
3.通过后腿小腿肌肉注射免疫小鼠(视频),每只小鼠注射100μl。
备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。
4.第21天按同样方式加强免疫1针。
备注:每次佐剂和抗原现配现用。
5.第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免疫和脾细胞融合。
QuickAntibody系列免疫佐剂有哪些特点?
与常规使用的弗氏佐剂相比,QuickAntibody免疫佐剂具有免疫周期短、针次少、无需乳化、抗原用量低、抗体滴度高、抗体亲合力高、易获得构象型表位的抗体等多方面优点,详述如下:
1.QuickAntibody只需两针免疫,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,与弗氏佐剂相比可减少免疫针次。
2.QuickAntibody通过减少免疫针次和降低每针次抗原用量,从而可大大节省总抗原用量。推荐使用的抗原用量为(1)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-50μg(通常为小鼠5-20μg,
兔子20-50μg);(2)免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-10μg(通常为小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。
3.QuickAntibody抗体产生快,抗体滴度高,抗体亲合力高。以标准免疫程序为例,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,只需要在三周内进行两针免疫,通常在第五周即可获得ELISA滴
度(Cutoff值为0.1000)高达1:10000-1:10000000的高亲合力抗体水平。
4.QuickAntibody-Mouse3W(3周标准鼠单抗/多抗制备佐剂)不破坏抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克隆抗体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。
5.QuickAntibody是水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可免疫动物。
6.QuickAntibody使用肌肉免疫途径,与常规小鼠单克隆抗体制备过程中使用足垫或脾内免疫相比,极大方便了使用。
7.QuickAntibody的一个重要用途是可方便地用于制备小鼠多克隆抗体。常规多克隆抗体制备多使用兔子,不但免疫针次多、抗原用量大和抗体产生慢,而且由于技术要求较高而往往需要委
托专门单位制备。使用QuickAntibody免疫佐剂,任何实验动物人员均可方便快速地制备小鼠多克隆抗体,标准免疫程序只需要简单地免疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克
隆抗体。(强烈推荐使用本佐剂制备小鼠多克隆抗体,1ml高质量的小鼠多克隆抗体足以满足绝大多数用户的实验需求,包括用于酶联免疫、免疫印迹、流式细胞、免疫组化和免疫沉淀等)。
8.QuickAntibody建议常温运输,2~8ºC保存,无菌取用,有效期18个月。
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文献和实验替代弗氏佐剂的新选择——QuickAntibody系列免疫佐剂
周期短?QuickAntibody佐剂有二周快速小鼠多抗制备佐剂、三周快速小鼠单多抗制备佐剂以及五周标准小鼠单多抗制备佐剂三种。若多抗即可满足客户需求,可以建议客户制备小鼠多抗,使用我们的佐剂最快仅需2周即可制备高滴度的小鼠多抗,最慢也只需5周即可制备成功,比常规弗式佐剂8周的制备时间相比,可节省3-6周的时间,从而大大提升了客户实验效率;若客户制备单抗,可以使用我们三周佐剂或五周佐剂,与常规使用弗式佐剂免疫时间8周相比,可以节省3-5周时间,也大大提升了客户实验效率,同时也节省动物饲养成本。 3、抗原用量少?
准确,且动物处于较少的生理扰乱下,用这种方法制备的模型进行实验研究,结果相对准确,误差小。齐淑英等利用铜圈置入法制备急性心肌缺血动物模型,其机理可能在于铜圈作为异物被置入冠脉内,会诱发冠脉内血栓形成,堵塞冠脉而发生急性心肌缺血。选健康杂种犬,体重19±4kg,硫喷妥钠10mg/kg静脉注射麻醉动物,左侧卧位固定于实验台上。右颈部常规备皮消毒,横行切开皮肤,逐层分离皮下组织,暴露右侧颈总动脉,结扎其远心端,近心端剪开直径约1/2,送入8F动脉穿刺器,X线下沿穿刺器送入7F 预塑形左冠脉主干,注射38
,起源于CBA/H品系,为X-染色体隐性遗传,其基因符号为xid。纯和型雌鼠(xid/xid)和杂合型雄鼠(xid/y)对Ⅱ型抗原(非胸腺依赖性抗原)以及双链DNA 等没有反应。对胸腺依赖性抗原缺乏抗体反应,IgG3、IgM低下。如果移植正常鼠的骨髓到xid宿主,B细胞缺失可得到恢复。而将xid鼠的骨髓移植到受射线照射的同系正常宿主,其仍然表现为不正常的表型。 2、T淋巴细胞缺陷动物疾病模型 胸腺分泌淋巴细胞缺陷导致细胞免疫功能丧失,临床表现为毛发缺乏和胸腺发育不全。1966年在苏格兰的一群小鼠中
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