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文献和实验，DMEM洗涤1次，弃上清。 ⑨重悬铺板：预冷基质胶重悬沉淀，每孔接种约15000个细胞，体积20~30μL，96孔板铺板。 ⑩胶凝固后加入预热完全培养基，继续培养7~14d至类器官成熟 阶段3：成像前样本预处理（分3小节，总耗时3.5h）。 1.24孔板基质胶薄层包被（30min，关键步骤） ①预冷PBS将GFR基质胶50倍稀释。 ②24孔盖玻片底培养板每孔加入200μL稀释基质胶。 ③37℃孵育20~30min，基质胶完全聚合。 关键质控：必须形成均匀薄层，保证所有类器官贴附在同一焦平面；高分
，分别注入液相色谱仪测定，记录峰面积为1449680、2879397、5714532、8511892、11294711，以进样量（μg）为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为A=63824+769911m，线性相关系数r=1.0000，线性范围1.8μg～14.6μg。 2.6 重现性试验 取样品（规格2ml∶20mg）1.6、2.0、2.4ml，各平分3份，置50ml置瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。依法测定结果见表1。 表1 重现性试验结果（略）
湿透，要及时更换吸水纸。 5、 转膜结束后，取出滤膜，边角剪一小角做标记。滤膜于2�SSC摇洗5min，用滤纸吸干；6、 用紫外交联照射（正面朝上）或于80℃烤箱烘烤0.5－2小时； 7、 膜可立即进行预杂交和杂交，或保存于4℃待以后应用； 8、 预杂交和杂交 1） 将杂交膜浸湿于6�SSC 2min，同时预热预杂交液和杂交炉至预杂交温度； 2） 杂交膜封于杂交袋，按0.2ml/cm2 膜面积加入预杂交液，预杂交至少1小时； 3） 用于southern blot的探针可分为DNA
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