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文献和实验科研君们,当埋头实验几月找到了目标基因片段,电泳时条带却突然消失了;千辛万苦分离纯化的物质,色谱图中却意外出现杂质峰,苦苦查询,可能仍找不到问题原因。若问题只在小小的吸头上,科研君的心还能淡定吗? 吸头的问题在哪里,如何保证纯净无污染的吸头?需要考虑以下几方面因素: 一、 吸头材质 吸头市场上,原材料基本都是聚丙烯塑料(低吸附,化学惰性高,使用温度范围广,无色透明)。也许大家不知道的是,同样是聚丙烯,品质会有大的差别。高品质的吸头一般采用天然 100% 纯聚丙烯,而低廉的吸头则很多
)规定:取尿 12ml 离心,相对离心力( RCF ) 400 × g ,离心 5 分钟,弃上清后留下 0.2ml( 用一种特制的带尖头的离心管,倾去上清后,恰好剩下 0.2ml) ,吸取 20ul ,加于载玻片上,加 22mm 2 的盖片,根据高镜头直径算出高倍视野面积,最后以每亳升尿中的细胞数报告。而日本临床检验标准委员会( JCCLS )指南 GP1 - P2 ( 1995 )则规定为:取尿 10ml ,用水平离心机离心, RCF 为 500 × g ,离心5 分钟,留下 0.2ml ,取
最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌,MTT对菌很敏感;往96孔板加时不避光也没有关系,毕竟时间较短,或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉.配制MTT时用用PBS溶解,也有人用生理盐水配,60℃水浴助溶。PBS配方:Nacl 8gKcl 0.2gNa2HPO4 1.44gKH2PO4 0.24g调ph 7.4定容1L关于细胞的接种(铺板)细胞过了30代以后就不要用了,因为状态不好了;培养板要用好的(最好进口板),不好的板或重复利用的板只可做预实验。接种时最好按照预实验摸索出的密度
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