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- 一基
- 上海
- YJKG5313-L
- 2025年07月14日
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- 文献和实验
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一基
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现货状态
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文献和实验科研君们，当埋头实验几月找到了目标基因片段，电泳时条带却突然消失了；千辛万苦分离纯化的物质，色谱图中却意外出现杂质峰，苦苦查询，可能仍找不到问题原因。若问题只在小小的吸头上，科研君的心还能淡定吗？ 吸头的问题在哪里，如何保证纯净无污染的吸头？需要考虑以下几方面因素： 一、 吸头材质 吸头市场上，原材料基本都是聚丙烯塑料（低吸附，化学惰性高，使用温度范围广，无色透明）。也许大家不知道的是，同样是聚丙烯，品质会有大的差别。高品质的吸头一般采用天然 100% 纯聚丙烯，而低廉的吸头则很多
药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。8.避免血清干扰。用含15％胎牛血清培养液培养细胞时，高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加，会试验敏感性。因此，一般选小于10％胎牛血清的培养液进行。在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。实验步骤贴壁细胞：1.收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。2.5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）,加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可
提取RNA 器械：离心管2支，吸管4个，酒精灯，打火机，记号笔，200ul,1000UL枪，DEPC泡过的枪头EP管，紫外照过的手套。滤纸，DEPC纯水（750ml无水乙醇＋150mlDEPC水,剧烈振荡，使劲的摇晃，直至混匀），氯仿，75％酒精，异丙醇，Trizol，预冷的离心机（两种），EP管架（洗液擦洗） 过程： 1. 取细胞悬液，室温下离心，1000rmp/min,6min,弃上清（此时可预冷另一个离心机） 2. 带手套，加Trizol 1ml/5-10*10
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