RNA酶抑制剂 10000u

RNA酶抑制剂 10000u
产品介绍
RNA酶抑制剂产品是从人胎盘中提取的一种广谱的核糖核酸酶抑制剂，它在分子生物学的实验中有着十分 广泛的应用。它是一个在任何应用中对付潜在RNase污染的十分有用处的试剂。
酶活：40u/ul
用途：RT-PCR，
cDNA合成中mRNA的保护，
体外转录和体外翻译，
制备RNase-free的抗体，
原位杂交和mRNA定位等，
核糖核酸酶抑制剂以20 mM HEPES-KOH（pH7.6）、50 mM KCl、8 mM DTT、50%（v/v）甘油制备。
来源：人胎盘。
活性范围：pH5-9（最高活性pH7-8）
存储条件：有关存储建议，请参见产品信息标签。避免多次冻融循环和频繁的温度变化。
单位定义：一个单位被定义为抑制核糖核酸酶A 5ng活性50%所需的RNASIN®核糖核酸酶抑制剂的量。活性通过核糖核酸酶A对胞苷2´，3´-环磷酸水解的抑制作用来测定。
用法说明：核糖核酸酶抑制剂在较宽的酸碱度范围内具有活性，但至少需要1毫米的二硫苏糖醇来维持活性。浓度梯度可能在冷冻产品中形成，并应在解冻时分散。使用前充分混合。
质量控制分析
污染活性核糖核酸酶分析：检测RNase活性的存在，1克g RNA与200单位天然核糖核酸酶抑制剂在37°C孵育1小时，然后在溴化乙锭染色琼脂糖凝胶上观察RNA，以验证是否存在降解，以检测潜伏核糖核酸酶活性的存在，核糖核酸酶抑制剂在67℃下热变性15分钟，在37℃下与200克单位的RNA孵育1小时，然后在溴化乙锭染色琼脂糖凝胶上观察RNA，以确认没有降解。
dnase分析：为了测试dnase活性，50ng放射性标记的DNA在37°C下与200单位的核糖核酸酶抑制剂孵育1小时，并通过TCA可溶物质的闪烁计数监测放射性标记的核苷酸的释放。最小合格规格小于3%的放行。
内切酶分析：为了测试内切酶活性，将1微克超螺旋质粒DNA与200单位核糖核酸酶抑制剂在37°C的限制酶缓冲液（6 mM Tris-HCl[pH7.5]，50 mM NaCl，6 mMgCl2，1 mM DTT）中孵育2小时。孵育后，将超螺旋（I型）DNA在溴化乙锭染色琼脂糖凝胶上观察，以验证没有可见切口或切割。
物理纯度：根据SDS聚丙胺凝胶的考马斯亮蓝染色判断，纯度大于90%。
由于核糖核酸酶通常在变性条件下保持活性，因此必须注意避免核糖核酸酶抑制剂分子变性。为防止活性核糖核酸酶的释放，应避免温度超过50°C和高浓度尿素或其他变性剂浓度过高。