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- 百奥莱博
- HR0368-JTO
- 北京
- 2025年07月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
339
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
5ml|10ml
特别提示：包括5×SDS-PAGE上样缓冲液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：5×SDS-PAGE上样缓冲液
产品货号：HR0368
产品规格：5ml|10ml
蛋白上样缓冲液是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液，采用优质原料配制，用于常规的SDS-PAGE蛋白电泳样品上样。
储存条件：-20℃保存。
有效期：一年。
使用方法：
1．按每 4 微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液(5×)的比例，混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液。
2．100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。
3．冷却到室温后离心数秒钟，混均后再离30秒钟，取上清直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
4．通常电泳时染料到达胶的底端附近(0.5-1cm)即可停止电泳。
我公司销售的5×SDS-PAGE上样缓冲液北京供应商，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验心灵交流 本人想请教高手：在westernblot中煮样时需不需加上loading buffer后再煮样？以及loadingbuffer和样加的比例如何定？如6Xloadingbuffer加到样中的量如何定？谢谢 zhong_cq 那是要加LOADING BUFFER, 6X的上样缓冲液，那样本与BUFFER之比为5：1（V/V）。 coffeeshine 和做SDS-PAGE一样，加
电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次（对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤）。 加入预冷的 RIPA 液（含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂），RIPA 液的用量：按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注：悬浮细胞，收集
，同时阴性对照保持干净。 Step 4｜加入SDS上样缓冲液终止反应 反应结束后立即加入SDS-PAGE上样缓冲液。 使用3× Sample Buffer时，可以按40 μL反应液＋20 μL 3×上样缓冲液处理，混匀后于95～100℃加热2～5 min，终止激酶反应并完成蛋白变性。 随后短暂离心，进入SDS-PAGE和Western blot。 Step 5｜先看磷酸化，再看总底物 有明确磷酸化位点抗体时，优先检测对应的p-Substrate。 同一批样本还要检测Total substrate
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