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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
51
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针(染料法只需设计引物)
2、抽提DNA、RNA,并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR 产品仅供科研使用
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品(引物、RNA和cDNA)
产品名称:伊丽莎白巴尔通体探针法荧光定量PCR试剂盒
规格:Bartonella elizabethae
编号:BJR2117
分类:探针法荧光定量PCR
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
规格及成分:
成 分 编 号 十孔盒包装
MMLV 逆转录酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀剂 50903 400 μL
TdT(末端转移酶) 120312 10 μL
2×TdT Buffer(含 dATP) 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0(含染料) 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手册 101105sc 1 份
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
储存条件:
产品仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
特点优势:
1. 产品仅用于科研特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR反应五要素:
伊丽莎白巴尔通体探针法荧光定量PCR试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
原Procyanidin质量规格:>95%,葡萄籽提取物 大鼠αACTIN基因甲基化检测试剂盒20 猴痘病毒(MPV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
原(标准品)Procyanidin质量规格:UV>95%,分析标准品 Ratlipoproteinlipase,LPLELISA试剂盒大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒规格:96T/48T humanProstaglandinF,PG-FELISA试剂盒人前列腺素F(PGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
胡椒碱Piperine质量规格:HPLC>97%,BR 小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒 ,英文名: PAF ELISA Kit ELISAKitTNFsR-Ⅰ小鼠坏死因子可溶性受体Ⅰ规格:48T/96T
辛辣内酯A(标准品)Pungiolide A质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA检测试剂盒MouseRetinol-bindingprotein,RBPELISAKit 96T/48T HumanComplemefragme4b,C4bELISAKit人补体片断4b(C4b)ELISA试剂盒规格:96T/48T
RatActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule,ALCAMELISAKit大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA试剂盒规格:96T/48T 7770-78-7牛蒡子苷元厂家 Arctigenin
载玻片细胞RHO蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 260413-62-5女贞苷说明书 ligustroflavone
Monkeyβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISA试剂盒猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒规格:96T/48T 1063-77-0诺米林品牌 Nomilin
小鼠中性粒细胞明胶酶关联脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒 ,英文名: NGAL ELISA Kit 88182-33-6欧当归内酯A规格 Levistilide A
犬细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA检测试剂盒Canineiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit 96T/48T 482-44-0欧前胡素厂家 Imperatorin
490-67-5冬绿苷规格 Gaultherin 植物维生素K1(VK1)ELISA检测试剂盒PlaVitaminK1,VK1ELISAKit 96T/48T
490-46-0表儿茶素说明书 Epicatechin 植物维生素E高效液相色谱法定量检测试剂盒20
490-46-0表儿茶素规格 Epicatechin 植物维生素E(VE)ELISA检测试剂盒PlaVitaminE,VEEELISAKit 96T/48T
489-32-7淫羊藿苷说明书 Icariin 植物维生素D3(VD3)ELISA检测试剂盒PlaVitaminD3,VD3ELISAkit 96T/48T
487-58-1刺桐碱厂家 hypaphorine;tryptophan betaine 植物维生素D2(VD2)ELISA检测试剂盒PlaVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T
伊丽莎白巴尔通体探针法荧光定量PCR试剂盒犬血栓素B2(TXB2)ELISA检测试剂盒CanineThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 96T/48T 66280-25-9戈米辛J厂家 Gomisin J
犬心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)试剂盒 Canine Cardiac oponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA kit 61371-55-9格列风内酯说明书 Griffonilide
英文名称HumanHistoneDeacetylaseELISAKit人组织蛋白去乙酰化酶(HD)规格:96T/48T 3681-99-0葛根素品牌 Puerarin
超声化鲑鱼精单链DNA10毫升 60-81-1根皮苷规格 Phlorizin
RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISA试剂盒大鼠糖原1酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒规格:96T/48T 60-82-2根皮素厂家 Phloretin
产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶片基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶片和种子。
使用及效果:将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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