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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
280
- 英文名:
5×SDS-PAGE loading buffer
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
2ml
特别提示:包括6×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:6×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液
英文名称:5×SDS-PAGE loading buffer
产品货号:KFS081
产品规格:2ml
本产品作为蛋白质电泳Loading Buffer,适用于变性聚丙xī酰胺凝胶电泳时的蛋白样品制备和上样。蛋白上样缓冲液是一种以溴酚蓝为染料, 6×SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液,用于常规的SDS-PAGE 蛋白电泳样品上样。
操作步骤
1. 按每5 微升蛋白样品加入1 微升6×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(6X)。
2. 100℃或沸水浴加热5 分钟,以充分变性蛋白。
3. 置冰上5 分钟,10000rpm 离心1 分钟,取上清直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。
储存:4℃,有效期12个月。
我公司销售的6×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液优惠促销,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心(3000 rpm,5 min)收集 Agarose 珠子,弃掉上清,用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。(小心吸取上清,避免触碰底部珠子) 收集沉淀,加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀,轻混均匀后煮沸 5 min,12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管,进行 Western 检测。
糖珠用 1 ml 裂解缓冲液洗 3~4 次;最后加入 15 μl 的 2 × SDS 上样缓冲液,沸水煮 5 分钟。 6. SDS-PAGE,Western blotting 或质谱仪分析。 三、通过免疫共沉淀确定结合蛋白 1. 用磷酸盐缓冲液洗 30 块 10 cm 培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到 1 ml 冰冷的 EBC 裂解缓冲液中。 2. 将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上 4 ℃ 以最大速度离心 15 min。 3. 收集上清(约 30 ml)并加入 30 μg 的适当
L 缓冲液I 溶解包涵体;室温放置lh ;加9×缓冲液Ⅱ,室温放置30 min ,用KOH 调pH 到10.7 ;用HCI 调至pH 8 .0 ,在室温放置至少30 min ; 1000g 离心,15 min ,室温;吸出上清液并保留,用100 μL 2×凝胶电泳加样缓冲液溶解沉淀;取10 μL 上清,加10 μL 2× 凝胶电泳加样缓冲液,与20 μL 重新溶解的沉淀进行SDS-PAGE 。四、注意事项(1)不同的大肠杆菌表达载体带有不同的启动子和诱导成分。实验者必须根据特定系统和用途决定
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