重组羧肽酶B（RCPB）

重组羧肽酶B（RCPB）

 

 

◆概述

 

羧肽酶B（E.C 3.4.17.2）属金属羧肽酶A和羧肽酶B（CPA/CPB）家族，可选择性水解蛋白或多肽羧基端的Arg和Lys。不同于切割芳香族或脂肪类氨基酸残基的羧肽酶A，羧肽酶B优先切割碱性氨基酸^※，同时也能切割一些非碱性氨基酸。重组CPB的活性受到典型的金属螯合剂如EDTA，及Cu²⁺，Hg²⁺抑制；而Zn²⁺，Mn²⁺等金属离子则能够不同程度提高酶活。CPB的最适pH为8.0，偏酸或偏碱均会造成活性下降，pH接近5.0时活性接近零，pH>12.0时活性完全丧失。CPB在一定温度内（<60 ℃）活性随温度升高而上升。

 

※碱性氨基酸：水解生成的氢氧根负离子多于氢正离子的氨基酸，其特点是侧链常含有可质子化的碱性化学基团。包括以下三种：

 

中文名	英文名	缩写	符号	等电点
精氨酸	Arginine	Arg	R	10.76
赖氨酸	Lysine	Lys	K	9.74
组氨酸	Histidine	His	H	7.59

 

 

◆优势

 

 

●　单批次产量大，批间差小

●　高纯度，高比活性

●　无外源性病毒污染，无动物源生产原料

 

 

◆应用范围

 

生产工艺：重组胰岛素及其类似物的生产制备工艺，重组多肽类药物的生产制备工艺等。

质控与科研：单克隆抗体的质量检测，蛋白质C-末端氨基酸测定等。

 

 

◆纯度

 

SDS-PAGE显示纯度＞90%。

 

 

◆使用方法

 

保存：25 mmol/L Tris-HCl， pH 7.6或无菌水；溶解后分装-15 ℃以下保存。

酶切体系：pH 7.5~9.0；

推荐使用量：蛋白酶：融合蛋白质量比1：50~1：1000

 

 

◆保存条件

 

储存稳定性：冻干粉存于-15 ℃以下，24个月稳定；25 mmol/L Tris-HCl，pH 7.6溶解后分装储存于-15 ℃以下，

储存稳定性：反复冻融5次，活性无损失；溶解后2~8 ℃保存建议不超过3 d。

运输稳定性：冰袋保温运输，活性稳定。

 

 

◆应用实例

 

RCPB特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKRLW及K，蛋白酶：合成多肽质量比1：5000，37 ℃酶切反应10 min，LC-MS验证酶切反应特异性。

 

 

Peak#	R.T.	M.W.	Sequence
Peak 1	7.06 min	950.15	YGKRLWK
Peak 2	8.27 min	821.98	YGKRLW

 

 

 

◆产品信息

 

产品编号	产品名称	规格	比活
RCPB0302	RCPB	10 mg	150 U/mg
RCPB0304	RCPB	10 μg	150 U/mg

 

 

◆相关产品

 

产品编号	产品名称	规格	储存条件	其他信息
MDRK0301	RCPB ELISA Kit 重组羧肽酶B检测试剂盒	96 孔	2～8 ℃	检测范围： 15.6～1000 ng/mL