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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
57
- 英文名:
Goose Parvoiruvs(GPV)
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
| 产品名称 | 鹅细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| 英文名称 | Goose Parvoiruvs(GPV) |
| 编号 | EY00P4071 |
鹅细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因,是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因,因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测鹅细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据鹅细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒保守区域设计引物和探针,能专一性地检测出样品中的鹅细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒成分,但不能检测其他非鹅细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒成分。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作,降低了交叉污染。
5. 快速,整个检测过程(按一个样品计)所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研,足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。

【技术保护点】
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒,其特征在于,由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成,其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶,上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’,下游引物序列为:5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为:5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’,D型荧光探针为:5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为:待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下是公司正在促销打折产品:
小鼠磷酸化细胞外信号调节激酶pERK定量检测试剂盒 Methyl decanoate 质量规格:分析标准品,用于环境分析,≥99.5%(GC)CAS: 110-42-9
小鼠磷酸化蛋白激酶CP-PKC定量检测试剂盒 Methyl decanoate 质量规格:Standard for GC ,≥99.5%(GC)CAS: 110-42-9
小鼠胶原酶ICollagenaseI定量检测试剂盒 Methyl cinnamate 质量规格:>98%,BRCAS: 103-26-4
人血小板衍生生长因子BBPDGF-BB定量检测试剂盒 Methyl cellulose, middle viscosity 质量规格:4000mPa.s,BRCAS: 9004-67-5
人角化细胞生长因子KGF定量检测试剂盒 Methyl cellulose 质量规格:粘度100000mPa.sCAS: 9004-67-5
人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白P-cad定量检测试剂盒 Methyl Calcein Blue Hydrate 质量规格:用于配位滴定铜时的指示剂CAS: 81028-96-8
人CD4分子CD4定量检测试剂盒 Methyl blue 质量规格:ARCAS: 28983-56-4
人白细胞共同抗原LCA/CD45定量检测试剂盒 Methyl behenate 质量规格:分析标准品CAS: 929-77-1
小鼠硫氧化还原蛋白Trx定量检测试剂盒 Methyl Arachidate 质量规格:分析标准品,≥99.0% (GC)CAS: 1120-28-1
人CD4分子CDl4定量检测试剂盒 Methyl Arachidate 质量规格:≥98.0%(GC)CAS: 1120-28-1
人干扰素诱导T细胞趋化因子ITAC/CXCL定量检测试剂盒 Methyl 4-hydroxy-3-methoxycinnamate 质量规格:美国进口CAS: 149567
人γ干扰素诱导单核细胞因子MIGF/CXCL9定量检测试剂盒 Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口CAS: 35511-15-0
人集落刺激因子CSF定量检测试剂盒 Methyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口CAS: 35511-14-9
小鼠硫氧还蛋白还原酶TrxR定量检测试剂盒 Methyl 3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carboxylate 质量规格:检查CAS: 1458-01-1
人细胞凋亡抑制因子IAP定量检测试剂盒 Methoxyphenamine HCl 质量规格:含量测定CAS: 1347292
鹅细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒EPCAM Others Human 人 EpCAM 人细胞裂解液 (阳性对照)
人皮肤鳞癌细胞;A-431 [A431]
PROC Others Human 人 PROC1 / Protein C / PROC 人细胞裂解液 (阳性对照)
3T6细胞,小鼠胚胎成纤维细胞 人前列腺癌细胞,gpc-1细胞 人视网膜色素上皮细胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg
恒河猴肾细胞;RM-3
小鼠皮层神经胶质细胞(EGFP标记)
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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