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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
35
- 英文名：
Campylobacter pybridis
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
荧光定量PCR试剂盒技术：
本实用新型专利技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型专利技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
产品名称：幽门弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Campylobacter pybridis
编号：EY00P3804
分类：探针荧光定量PCR试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
主要特征：
准确性高：创新的ASL Probe修饰探针和高特异性SNP Ligase有力的保证了分型的准确率。
重复性好：该分型体系经过反复验证和优化，获得的数据重复性极好。
低成本：无需合成大量昂贵的双标探针。
无需高质量的基因组DNA：粗提物即可进行实验操作。便于快速大量制备基因组DNA。通常386个全血DNA可在30min内制备完毕。
操作简单：简单易懂、结果清晰的分型判断标准，在PCR仪充足的情况下，单人可轻松完成超过3860个SNP数据分析。
应用：
分子标记辅助育种
遗传疾病诊断
致病候选基因研究
药物筛选研究
群体遗传研究
产品特点
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记：
TaqMan法
TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针
相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
相对定量分析方法 ：
2-ΔΔCt
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值：
ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
3、计算表达水平比率：
2 –ΔΔCT=表达量的比值
几种传统荧光定量PCR方法简介：
1）幽门弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒内参照法：
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
2）竞争法：
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
3）PCR－ELISA法：
利用生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
以下是公司正在促销打折产品：
用于马尿酸盐实验 特价促销 茚三酮试剂（马尿酸盐试剂）
用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养，也可用于消毒效果测定（GB/T4789.28－2003 中4.7 ，GB/T4... 特价促销 营养琼脂
用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养，也可用于消毒效果测定（GB/T4789.28－2003 中4.7 ，GB/T47... 特价促销 营养琼脂
供细菌总数测定、保存菌种及纯培养用，也可用于消毒效果测定。(GB、ISO) 特价促销 营养琼脂
用于空间环境中浮游菌及沉降菌等微生物的测定以及实验室相关微生物指标的测定 特价促销 营养琼脂(NA)接触皿
用于细菌总数测定、纯培养及保存菌种，也可用于消毒效果测定 特价促销 营养琼脂(NA)瓶装颗粒培养基
用于空间环境中浮游菌及沉降菌等微生物的测定以及实验室相关微生物指标的测定 特价促销 营养琼脂(NA)三层无菌包装即用平板
CAMKIV/CAMK4 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶4抗体 特价促销
CAMKK2 钙调蛋白激酶激酶β抗体 特价促销
CAMTA1 钙调蛋白结合转录激活因子1抗体 特价促销
Cancer/testis antigen 1B/1A 肿瘤/抗原1B/1A 特价促销
CANX/Calnexin 钙连蛋白抗体 特价促销
CAP1/PARK7 CAP1抗体 特价促销
CAP2 环酶相关蛋白CAP-2抗体 特价促销
CAP57 中性粒细胞杀菌蛋白BP30抗体 特价促销
CAPD2/CNAP1 染色体相关蛋白2抗体 特价促销
CAPD3/hCAP-D3 浓缩素2复合亚基D3抗体 特价促销
Anti-rat TRPV1 （extracellular) rat TRPV1 （胞外)抗体（25 ul)
Anti-rat TRPV1 （extracellular) rat TRPV1 （胞外)抗体（0.2 ml)
Anti-rat TRPV1 （extracellular)-ATTO-488 rat TRPV1 （胞外)-ATTO-488抗体（50 ul)
Anti-Rat p75NTR Rat p75NTR抗体（50 ug)
Anti-Rat p75NTR Rat p75NTR抗体（10 ug)
Anti-Rat p75NTR-FITC Rat p75NTR-FITC抗体（50 ug)
Anti-Rat H2 Histamine Receptor （extracellular) Rat H2 Histamine 受体 （胞外)抗体（50 ul)
Anti-Rat H2 Histamine Receptor （extracellular) Rat H2 Histamine 受体 （胞外)抗体（0.2 ml)
RAIN Polyclonal Antibody Ras相互作用蛋白1 抗体
RAP1B Polyclonal Antibody Ras相关蛋白RAP1B 抗体
幽门弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒Fluid thilglycolate medium 疏基乙酸盐培养基 1.08191.0500MERCK默克
FRASER Listeria Selective Enrichment Broth( base) 1.10398.0500MERCK默克
弗雷泽李斯特菌选择富集肉汤（基础）
FRASER Listeria Selective Supplement 弗雷泽李斯特菌选择添加剂 1.10399.0001MERCK默克
Agar for fungi acc.to KIMMIG( base) modified 真菌改性琼脂（氯化） 1.05414.0500MERCK默克
Agar GASSNER Water-blue metachrome-yellow lactose agar acc.to GASSNER GASSNER 琼脂/水溶蓝偏烙黄乳糖琼脂 1.01282.0500MERCK默克
BSC-1(猴肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M062小鼠肾小管上皮细胞完全培养基100mL 人前列腺癌细胞;PC-3 [PC3]
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A
CLEC4A2 Others Rat 大鼠 CLEC4A2 / DCIR 人细胞裂解液 (阳性对照)
Dami细胞，人巨核细胞保白血病细胞 小鼠网织细胞肉瘤,M5076细胞 前列腺上皮细胞生长添加物PEpiCGS
NCI-H2227(人小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
心脏微血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
内标对荧光定量PCR的影响：
1．实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2．内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标，则PCR反应变为双重PCR，双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争，尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时，这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的，所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因，传统定量方法虽然加入内标，但仍然只是一种半定量的方法。
本实用新型专利技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型专利技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
产品名称：幽门弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Campylobacter pybridis
编号：EY00P3804
分类：探针荧光定量PCR试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
主要特征：
准确性高：创新的ASL Probe修饰探针和高特异性SNP Ligase有力的保证了分型的准确率。
重复性好：该分型体系经过反复验证和优化，获得的数据重复性极好。
低成本：无需合成大量昂贵的双标探针。
无需高质量的基因组DNA：粗提物即可进行实验操作。便于快速大量制备基因组DNA。通常386个全血DNA可在30min内制备完毕。
操作简单：简单易懂、结果清晰的分型判断标准，在PCR仪充足的情况下，单人可轻松完成超过3860个SNP数据分析。
应用：
分子标记辅助育种
遗传疾病诊断
致病候选基因研究
药物筛选研究
群体遗传研究
产品特点
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记：
TaqMan法
TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针
相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
相对定量分析方法 ：
2-ΔΔCt
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值：
ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
3、计算表达水平比率：
2 –ΔΔCT=表达量的比值
几种传统荧光定量PCR方法简介：
1）幽门弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒内参照法：
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
2）竞争法：
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
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Anti-rat TRPV1 （extracellular) rat TRPV1 （胞外)抗体（0.2 ml)
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弗雷泽李斯特菌选择富集肉汤（基础）
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Agar for fungi acc.to KIMMIG( base) modified 真菌改性琼脂（氯化） 1.05414.0500MERCK默克
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BSC-1(猴肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M062小鼠肾小管上皮细胞完全培养基100mL 人前列腺癌细胞;PC-3 [PC3]
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A
CLEC4A2 Others Rat 大鼠 CLEC4A2 / DCIR 人细胞裂解液 (阳性对照)
Dami细胞，人巨核细胞保白血病细胞 小鼠网织细胞肉瘤,M5076细胞 前列腺上皮细胞生长添加物PEpiCGS
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内标对荧光定量PCR的影响：
1．实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2．内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标，则PCR反应变为双重PCR，双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争，尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时，这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的，所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因，传统定量方法虽然加入内标，但仍然只是一种半定量的方法。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
】 1. 器材 荧光定量PCR仪，微需氧袋。 2. 试剂 幽门螺杆菌菌株NCTC 11637，布氏肉汤培养基（Brucella Broth），2％尿素水溶液，酚红磷酸缓冲液。幽门螺杆菌荧光定量PCR试剂盒。 醋酸缓冲液(pH3.6)： 无水醋酸钠 1.64 g 醋酸 2.5 ml 蒸馏水 200 ml 1%硝酸银溶液： 硝酸银
相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验，实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见，不过也有实验室前没有做过的，查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物，探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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