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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存：
49
- 英文名：
Brachyspira hyodisenteriae
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
产品名称：猪痢疾短螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Brachyspira hyodisenteriae
编号：EY00P3777
分类：探针荧光定量PCR试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
荧光定量PCR试剂盒技术：
本实用新型专利技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型专利技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
主要特征：
准确性高：创新的ASL Probe修饰探针和高特异性SNP Ligase有力的保证了分型的准确率。
重复性好：该分型体系经过反复验证和优化，获得的数据重复性极好。
低成本：无需合成大量昂贵的双标探针。
无需高质量的基因组DNA：粗提物即可进行实验操作。便于快速大量制备基因组DNA。通常386个全血DNA可在30min内制备完毕。
操作简单：简单易懂、结果清晰的分型判断标准，在PCR仪充足的情况下，单人可轻松完成超过3860个SNP数据分析。
应用：
分子标记辅助育种
遗传疾病诊断
致病候选基因研究
药物筛选研究
群体遗传研究
产品特点
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记：
TaqMan法
TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针
相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
相对定量分析方法 ：
2-ΔΔCt
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值：
ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
3、计算表达水平比率：
2 –ΔΔCT=表达量的比值
几种传统荧光定量PCR方法简介：
1）猪痢疾短螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒内参照法：
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
2）竞争法：
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
3）PCR－ELISA法：
利用生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
内标对荧光定量PCR的影响：
1．实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2．内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标，则PCR反应变为双重PCR，双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争，尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时，这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的，所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因，传统定量方法虽然加入内标，但仍然只是一种半定量的方法。
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用于妆品粪大肠菌群的测定。(妆品卫生规范) 特价促销 乳糖胆盐培养基（含中和剂）
用于水中多管发酵法或滤膜法测定大肠菌群(GB/T5750.12-2006和GB/T8538-2008)。 特价促销 乳糖蛋白胨培养液
用于多管发酵法测定食品、纯净水和一次性使用卫生用品中大肠菌群的确证试验（中华人民共和国药典... 特价促销 乳糖发酵培养基
用于多管发酵法测定食品、纯净水和一次性使用卫生用品中大肠菌群的确证试验 特价促销 乳糖发酵培养基
用于多管发酵法测定一次性使用卫生用品中大肠菌群的确证试验。(GB) 特价促销 乳糖发酵培养基(乳糖复发酵培养基)
细菌生鉴定 特价促销 乳糖明胶
C12ORF40 12号染色体开放阅读框40抗体 特价促销
C12ORF42 12号染色体开放阅读框42抗体 特价促销
C12ORF49 12号染色体开放阅读框49抗体 特价促销
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C12ORF54 12号染色体开放阅读框54抗体 特价促销
C12ORF61 12号染色体开放阅读框61抗体 特价促销
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sRANK Ligand Antibody （soluble Receptor Activator of NFkB Ligand， TNFSF11， TRANCE （TNF-related activation-induced cytokine）， OPGL， ODF （Osteoclast differentiation factor）） sRANK Ligand抗体
SPHKAP Antibody （A-kinase anchor protein SPHKAP， SPHK1 interactor， AKAP domain containing， DKFZp781H143， DKFZp781J171， KIAA1678， MGC132614 antibody， MGC132616， SKIP antibody， A-kin SPHKAP抗体
Sphingosine Kinase 2 （SPK2） Antibody，SPK2，SPK-2，SPK 2，sphk，SK 2，SK2 Sphingosine Kinase 2 （SPK2）抗体
Sphingosine Kinase 1 （SPK1） Antibody，SPK1，SPK-1，SPK 1，sphk，SK1，SK 1 Sphingosine Kinase 1 （SPK1）抗体
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 3-ATTO-488 Sphingosine 1-Phosphate 受体 3-ATTO-488抗体（50 ul)
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 3 （extracellular) Sphingosine 1-Phosphate 受体 3 （胞外)抗体（50 ul)
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 3 （extracellular) Sphingosine 1-Phosphate 受体 3 （胞外)抗体（0.2 ml)
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 2 Sphingosine 1-Phosphate 受体 2抗体（50 ul)
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 2 Sphingosine 1-Phosphate 受体 2抗体（25 ul)
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 2 Sphingosine 1-Phosphate 受体 2抗体（0.2 ml)
猪痢疾短螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒蛋白胨水培养基 250(g)
改良马液体培养基 250(g)
改良马琼脂培养基 250(g)
胆盐乳糖发酵培养基 250(g)
氯化钠-蛋白胨缓冲液（pH7.0） 250(g)
检定用培养基 250(g)
人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC) ( 5×105 ) RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞 Rattus
兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2
NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人细胞裂解液 (阳性对照)
PK15-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)猪肾上皮细胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin
IL13 Protein Human 重组人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 标签)
胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL
英文名称：Brachyspira hyodisenteriae
编号：EY00P3777
分类：探针荧光定量PCR试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
荧光定量PCR试剂盒技术：
本实用新型专利技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型专利技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
主要特征：
准确性高：创新的ASL Probe修饰探针和高特异性SNP Ligase有力的保证了分型的准确率。
重复性好：该分型体系经过反复验证和优化，获得的数据重复性极好。
低成本：无需合成大量昂贵的双标探针。
无需高质量的基因组DNA：粗提物即可进行实验操作。便于快速大量制备基因组DNA。通常386个全血DNA可在30min内制备完毕。
操作简单：简单易懂、结果清晰的分型判断标准，在PCR仪充足的情况下，单人可轻松完成超过3860个SNP数据分析。
应用：
分子标记辅助育种
遗传疾病诊断
致病候选基因研究
药物筛选研究
群体遗传研究
产品特点
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记：
TaqMan法
TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针
相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
相对定量分析方法 ：
2-ΔΔCt
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值：
ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
3、计算表达水平比率：
2 –ΔΔCT=表达量的比值
几种传统荧光定量PCR方法简介：
1）猪痢疾短螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒内参照法：
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
2）竞争法：
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
3）PCR－ELISA法：
利用生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
内标对荧光定量PCR的影响：
1．实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2．内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标，则PCR反应变为双重PCR，双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争，尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时，这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的，所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因，传统定量方法虽然加入内标，但仍然只是一种半定量的方法。
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sRANK Ligand Antibody （soluble Receptor Activator of NFkB Ligand， TNFSF11， TRANCE （TNF-related activation-induced cytokine）， OPGL， ODF （Osteoclast differentiation factor）） sRANK Ligand抗体
SPHKAP Antibody （A-kinase anchor protein SPHKAP， SPHK1 interactor， AKAP domain containing， DKFZp781H143， DKFZp781J171， KIAA1678， MGC132614 antibody， MGC132616， SKIP antibody， A-kin SPHKAP抗体
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Sphingosine Kinase 1 （SPK1） Antibody，SPK1，SPK-1，SPK 1，sphk，SK1，SK 1 Sphingosine Kinase 1 （SPK1）抗体
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 3-ATTO-488 Sphingosine 1-Phosphate 受体 3-ATTO-488抗体（50 ul)
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 3 （extracellular) Sphingosine 1-Phosphate 受体 3 （胞外)抗体（50 ul)
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 3 （extracellular) Sphingosine 1-Phosphate 受体 3 （胞外)抗体（0.2 ml)
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 2 Sphingosine 1-Phosphate 受体 2抗体（50 ul)
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 2 Sphingosine 1-Phosphate 受体 2抗体（25 ul)
Anti-Sphingosine 1-Phosphate Receptor 2 Sphingosine 1-Phosphate 受体 2抗体（0.2 ml)
猪痢疾短螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒蛋白胨水培养基 250(g)
改良马液体培养基 250(g)
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胆盐乳糖发酵培养基 250(g)
氯化钠-蛋白胨缓冲液（pH7.0） 250(g)
检定用培养基 250(g)
人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC) ( 5×105 ) RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞 Rattus
兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2
NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人细胞裂解液 (阳性对照)
PK15-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)猪肾上皮细胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin
IL13 Protein Human 重组人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 标签)
胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL
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文献和实验相关实验
上还连接有MGB (Minor Groove Binder)修饰基团，可以将探针的Tm值提高10°C左右。因此为了获得同样的Tm值，MGB探针可以比普通TaqMan探针设计得更短，既降低了合成成本，也使得探针设计的成功率大为提高——因为在模板的DNA碱基组成不理想的情况下，短的探针比长的更容易设计。实验证明，TaqMan MGB探针对于富含A/T的模板可以区分得更为理想。 Taqman探针法已经得到广泛使用，不过有人认为这种技术利用了Taq酶5`—3`外切酶活性，一般试剂厂家只给Taq
(9) 内耳疾病研究，动物代血浆和补体原料。 4．地鼠：金地鼠，中国地鼠 金地鼠为冬眠动物，胎儿发育快，有颊囊，可供组织移植和缺少组织相容性抗原的免疫学试验、也可作微循环的观察用。地鼠肾细胞可供脑炎、流感、腺病毒、立克次氏体，原虫分离用。也是制作脑炎疫苗的原材料。还用于维生素、核黄素缺乏试验和不同血清型钩端螺旋体的模型动物。 中国地鼠妊娠期短，是有自发糖尿病的品系。可用于肺炎球菌肺炎、利什曼氏病、白喉、结核病、狂犬病、流感和脑炎的研究。中国地鼠染色体数目少，已作为遗传学研究的材料
紊乱开始恢复，临床症状消失，机体产生免疫力，体内的病原体被消除，不再起传染源的作用，例如麻疹。但有些传染病，如细菌性痢疾、乙型病毒性肝炎等在恢复期内仍能排出病原体，可继续作为传染源。有些疾病排出病原体的时间更长，甚至可终身作为传染源，例如伤寒慢性带菌者。 传染期（infection period）指病人能排出病原体的整个时间。传染期的长短因病而异，传染期短的疾病其续发病例呈簇状出现，每簇病例之间的间隔相当于该病的潜伏期。传染期长的疾病，续发病例常陆续出现，持续时间较长。传染期是决定病人隔离
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