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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
48
- 英文名：
Adenovirus(AV)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
荧光定量PCR试剂盒技术：
本实用新型专利技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型专利技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
产品名称：腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Adenovirus(AV)
编号：EY00P3653
分类：探针荧光定量PCR试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
主要特征：
准确性高：创新的ASL Probe修饰探针和高特异性SNP Ligase有力的保证了分型的准确率。
重复性好：该分型体系经过反复验证和优化，获得的数据重复性极好。
低成本：无需合成大量昂贵的双标探针。
无需高质量的基因组DNA：粗提物即可进行实验操作。便于快速大量制备基因组DNA。通常386个全血DNA可在30min内制备完毕。
操作简单：简单易懂、结果清晰的分型判断标准，在PCR仪充足的情况下，单人可轻松完成超过3860个SNP数据分析。
应用：
分子标记辅助育种
遗传疾病诊断
致病候选基因研究
药物筛选研究
群体遗传研究
产品特点
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记：
TaqMan法
TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针
相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
相对定量分析方法 ：
2-ΔΔCt
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值：
ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
3、计算表达水平比率：
2 –ΔΔCT=表达量的比值
几种传统荧光定量PCR方法简介：
1）腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒内参照法：
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
2）竞争法：
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
3）PCR－ELISA法：
利用生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
以下是公司正在促销打折产品：
(S,S)-帕洛诺司琼盐盐-d4 现货供应 (S,S)-Palonosetron Hydrochloride Labeled d4
(S,S)-(+)-2,3-二醇(>97.0%(GC)) 现货供应 (S,S)-(+)-2,3-Butanediol
(S)-盐乐卡地平 现货供应 (S)-Lercanidipine Hydrochloride
(S)-盐氟西汀-d5 现货供应 (S)-Fluoxetine-d5 Hydrochloride
(S)-盐氟西汀 现货供应 (S)-Fluoxetine Hydrochloride
(S)-盐卓斯汀 现货供应 (S)-Azelastine Hydrochloride
(S)-盐奥昔布宁 现货供应 (S)-Oxybutynin hydrochloride
(S)-腺苷，环3',5'-（氢代磷酯）三基胺 现货供应 (S)-Adenosine, cyclic 3',5'-(hydrogenphosphorothioate) triethylammonium
(S)-酰基萘普生-β-D-葡萄糖苷基酯 现货供应 (S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide Benzyl Ester
(S)-酰基萘普生-β-D-葡萄糖苷 现货供应 (S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide
(S)-西酞普兰N-氧物 现货供应 (S)-Citalopram N-Oxide
(S)-酮咯 现货供应 (S)-Ketorolac
(S)-坦索罗辛盐盐 现货供应 (S)-Tamsulosin Hydrochloride
(S)-普拉克索二盐物 现货供应 (S)-Pramipexole Dihydrochloride
(S)-萘普生异酰基-β-D-葡萄糖苷 现货供应 (S)-Naproxen Iso-acyl-β-D-glucuronide
(S)-美托洛尔 现货供应 (S)-Metoprolol
(S)-兰索拉唑 现货供应 (S)-Lansoprazole
(S)赖诺普利-d5 现货供应 (S) Lisinopril-d5
CREB-1 (phospho Ser142) Polyclonal Antibody 环腺苷酸反应元件结合蛋白-1 (phospho Ser142) 抗体
CREB-1 (phospho Ser133) Polyclonal Antibody 环腺苷酸反应元件结合蛋白-1 (phospho Ser133) 抗体
HEXI2 Polyclonal Antibody 环己二酰胺可诱导蛋白2 抗体
CNGB3 Polyclonal Antibody 环核苷酸阀门通道β3 抗体
CNGA3 Polyclonal Antibody 环核苷酸阀门通道α3 抗体
TLN2 Polyclonal Antibody 踝蛋白2 抗体
TXLNA Polyclonal Antibody 滑行蛋白α 抗体
APC4 Polyclonal Antibody 后期启动复合体亚基4 抗体
EPYC Polyclonal Antibody 骺蛋白聚糖 抗体
EpoR (phospho Tyr426) Polyclonal Antibody 红细胞生成素受体(phospho Tyr426) 抗体
腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒O/F培养基(HLGB) 250用于鉴别弧菌葡萄糖代谢类型（发酵型或氧化型）（SN标准）
氯化钠结晶紫增菌液 250用于副溶血性弧菌的选择性增菌培养（GB标准）
氯化钠蔗糖琼脂 250用于副溶血性弧菌的选择性分离培养（GB标准）
嗜盐菌选择性琼脂 250用于副溶血性弧菌的选择性分离培养（GB标准）
氯化钠血琼脂基础 250用于副溶血性弧菌的溶血试验
霍乱双糖铁琼脂(KIA) 250用于霍乱弧菌的生化试验（SN标准）
改良酸盐缓冲液PSBPhosphate Saline Buffer,Modified用于小肠结肠炎耶尔森氏菌冷增菌培养 （GB标准）
ITC肉汤ITC Broth用于分离培养耶尔森氏菌(ISO方法)
CIN-1I培养基基础Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌 （GB标准）
营养肉汤（NB）Nutrient Broth一般细菌培养,转种,复壮,增菌等.也可用于消毒效果测定
营养琼脂（NA）Nutrient Agar细菌计数(GB标准),不含糖,可作血琼脂基础,传代用.也可用于消毒效果测定
内标对荧光定量PCR的影响：
1．实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2．内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标，则PCR反应变为双重PCR，双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争，尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时，这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的，所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因，传统定量方法虽然加入内标，但仍然只是一种半定量的方法。
本实用新型专利技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型专利技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
产品名称：腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Adenovirus(AV)
编号：EY00P3653
分类：探针荧光定量PCR试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
主要特征：
准确性高：创新的ASL Probe修饰探针和高特异性SNP Ligase有力的保证了分型的准确率。
重复性好：该分型体系经过反复验证和优化，获得的数据重复性极好。
低成本：无需合成大量昂贵的双标探针。
无需高质量的基因组DNA：粗提物即可进行实验操作。便于快速大量制备基因组DNA。通常386个全血DNA可在30min内制备完毕。
操作简单：简单易懂、结果清晰的分型判断标准，在PCR仪充足的情况下，单人可轻松完成超过3860个SNP数据分析。
应用：
分子标记辅助育种
遗传疾病诊断
致病候选基因研究
药物筛选研究
群体遗传研究
产品特点
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记：
TaqMan法
TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针
相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
相对定量分析方法 ：
2-ΔΔCt
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值：
ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
3、计算表达水平比率：
2 –ΔΔCT=表达量的比值
几种传统荧光定量PCR方法简介：
1）腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒内参照法：
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
2）竞争法：
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
3）PCR－ELISA法：
利用生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
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(S)-西酞普兰N-氧物 现货供应 (S)-Citalopram N-Oxide
(S)-酮咯 现货供应 (S)-Ketorolac
(S)-坦索罗辛盐盐 现货供应 (S)-Tamsulosin Hydrochloride
(S)-普拉克索二盐物 现货供应 (S)-Pramipexole Dihydrochloride
(S)-萘普生异酰基-β-D-葡萄糖苷 现货供应 (S)-Naproxen Iso-acyl-β-D-glucuronide
(S)-美托洛尔 现货供应 (S)-Metoprolol
(S)-兰索拉唑 现货供应 (S)-Lansoprazole
(S)赖诺普利-d5 现货供应 (S) Lisinopril-d5
CREB-1 (phospho Ser142) Polyclonal Antibody 环腺苷酸反应元件结合蛋白-1 (phospho Ser142) 抗体
CREB-1 (phospho Ser133) Polyclonal Antibody 环腺苷酸反应元件结合蛋白-1 (phospho Ser133) 抗体
HEXI2 Polyclonal Antibody 环己二酰胺可诱导蛋白2 抗体
CNGB3 Polyclonal Antibody 环核苷酸阀门通道β3 抗体
CNGA3 Polyclonal Antibody 环核苷酸阀门通道α3 抗体
TLN2 Polyclonal Antibody 踝蛋白2 抗体
TXLNA Polyclonal Antibody 滑行蛋白α 抗体
APC4 Polyclonal Antibody 后期启动复合体亚基4 抗体
EPYC Polyclonal Antibody 骺蛋白聚糖 抗体
EpoR (phospho Tyr426) Polyclonal Antibody 红细胞生成素受体(phospho Tyr426) 抗体
腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒O/F培养基(HLGB) 250用于鉴别弧菌葡萄糖代谢类型（发酵型或氧化型）（SN标准）
氯化钠结晶紫增菌液 250用于副溶血性弧菌的选择性增菌培养（GB标准）
氯化钠蔗糖琼脂 250用于副溶血性弧菌的选择性分离培养（GB标准）
嗜盐菌选择性琼脂 250用于副溶血性弧菌的选择性分离培养（GB标准）
氯化钠血琼脂基础 250用于副溶血性弧菌的溶血试验
霍乱双糖铁琼脂(KIA) 250用于霍乱弧菌的生化试验（SN标准）
改良酸盐缓冲液PSBPhosphate Saline Buffer,Modified用于小肠结肠炎耶尔森氏菌冷增菌培养 （GB标准）
ITC肉汤ITC Broth用于分离培养耶尔森氏菌(ISO方法)
CIN-1I培养基基础Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌 （GB标准）
营养肉汤（NB）Nutrient Broth一般细菌培养,转种,复壮,增菌等.也可用于消毒效果测定
营养琼脂（NA）Nutrient Agar细菌计数(GB标准),不含糖,可作血琼脂基础,传代用.也可用于消毒效果测定
内标对荧光定量PCR的影响：
1．实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2．内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标，则PCR反应变为双重PCR，双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争，尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时，这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的，所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因，传统定量方法虽然加入内标，但仍然只是一种半定量的方法。
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文献和实验相关实验
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