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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
47
- 英文名:
Adenovirus(AV)
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
| 产品名称 | 腺病毒C型探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| 英文名称 | Adenovirus(AV) |
| 编号 | EY00P3652 |
腺病毒C型探针法荧光定量PCR试剂盒从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因,是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因,因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测腺病毒C型探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据腺病毒C型探针法荧光定量PCR试剂盒保守区域设计引物和探针,能专一性地检测出样品中的腺病毒C型探针法荧光定量PCR试剂盒成分,但不能检测其他非腺病毒C型探针法荧光定量PCR试剂盒成分。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作,降低了交叉污染。
5. 快速,整个检测过程(按一个样品计)所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研,足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。

【技术保护点】
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒,其特征在于,由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成,其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶,上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’,下游引物序列为:5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为:5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’,D型荧光探针为:5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为:待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下是公司正在促销打折产品:
[Val5]-血管紧张素 II 醋盐水合物 现货供应 [Val5]-Angiotensin II acetate salt hydrate
[Tyr9]- β-促黑激素 (猪) 现货供应 [Tyr9]- β-MSH (porcine)
[Tyr8]缓激肽 现货供应 [Tyr8] Bradykinin
[Tyr34]-状旁腺激素(7-34) 酰胺 (牛) 现货供应 [Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)
[Trp4]-Kemptide 现货供应 [Trp4]-Kemptide
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[Nle8’18,Tyr34]-状旁腺激素(7-34)酰胺 (牛) 现货供应 [Nle8’18,Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)
[Nle8’18,Tyr34]-状旁腺激素(3-34) 酰胺(牛) 现货供应 [Nle8’18,Tyr34]-pTH (3-34) amide (bovine)
[Nle8’18,Tyr34]-状旁腺激素(1-34) 酰胺 (牛) 现货供应 [Nle8’18,Tyr34]-pTH (1-34) amide (bovine)
[Nle4,DPhe7] a-促黑激素酰胺; 美拉诺坦 I 现货供应 [Nle4,DPhe7] a-MSH, amide; Melanotan I
(顺式)氟伏沙明 现货供应 (Z) Fluvoxamine
(肼基羰基)二茂铁(>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色谱标记) 现货供应 (Hydrazinocarbonyl)ferrocene
(Z)-4-羟基它莫西芬 现货供应 (Z)-4-Hydroxytamoxifen
(Z)-4-羟基-N-去基它莫西芬 (同分异构体混合物) 现货供应 (Z)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen (mixture of isomers)
(Z) 4-羟基基它莫西芬-d5 现货供应 (Z) 4-Hydroxy Tamoxifen Ethyl-d5
(S型)人参皂苷Rh2(标准品) 现货供应 Ginsenoside Rh2
(S型)人参皂苷Rg3(标准品) 现货供应 Ginsenoside Rg3
RNF41 Polyclonal Antibody 环指蛋白41 抗体
RN185 Polyclonal Antibody 环指蛋白185 抗体
RN141 Polyclonal Antibody 环指蛋白141 抗体
RN135 Polyclonal Antibody 环指蛋白135 抗体
RN123 Polyclonal Antibody 环指蛋白123 抗体
TRI56 Polyclonal Antibody 环指蛋白109/含三联基元蛋白56 抗体
COX2 Polyclonal Antibody 环氧酶2 抗体
COX2 Monoclonal Antibody 环氧酶2 单克隆抗体
COX1 Polyclonal Antibody 环氧酶1 抗体
CREB-1 Monoclonal Antibody 环腺苷酸反应元件结合蛋白-1 单克隆抗体
腺病毒C型探针法荧光定量PCR试剂盒四号琼脂基础 250用于霍乱弧菌选择性分离培养,灭菌冷至50℃加入亚碲酸钾,倒平板
我妻氏培养基基础 250用于神奈川现象试验(SN标准)
60%/L氯化钠蛋白胨肉汤 250用于副溶血性弧菌的前增菌培养
氯化钠三糖铁 250用于副溶血性弧菌的生化反应筛选(SN标准)
胰胨大豆琼脂斜面(TSA) 250培养副溶血性弧菌,做细胞色素氧化酶实验(SN标准)
42℃生长培养基 250用于副溶血性弧菌42℃生长试验
氮钠葡萄糖肉汤Azide Dextrose Broth用于链球菌的增菌培养
KF链球菌琼脂KF Streptococcus Agar用于链球菌的选择性分离及计数(SN标准)
LIM培养基LIM Medium用于链球菌的分离培养(Japan方法)
BETA-SSA琼脂BETA-SSA Agar用于链球菌的选择性分离培养(ACUMEDIA方法)
改良Y培养基Agar Y,Modified用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌 (GB标准)
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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