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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 检测方法:
可见分光光度法
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
50管/48样
试剂盒名称:琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒
规格:50管/48样
保存:2-8℃ 测试方法:可见分光光度法
应用领域:用于科学研究、教学、分析检测中。 用途:科研实验
测定意义
SDH(EC 1.3.5.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH是线粒体的一种标志酶,位于线粒体内膜上的一种膜结合酶,是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外,为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。
测定原理
SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二靛酚(DCPIP),并且在600nm处具有特征吸收峰,通过600nm吸光度的变化,测定2.6-DPIP的还原速度,代表SDH酶活性。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
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文献和实验琥珀酸脱氢酶硝基蓝四唑盐法 在生物代谢过程中,由氢的供体(donor)把氢原子转移到氢的受体(receptor)的酶促反应称脱氢酶反应,该反应由脱氢酶(dehydrogenases)催化。脱氢酶种类很多,其活性均可通过四唑盐显示。四唑盐作为脱氢酶反应中的受氢体,接受脱氢酶作用于底物所释放的氢而形成有色的甲腊(formazane),沉积于酶所在部位。 琥珀酸脱氢酶(succlnate dehydrogenase,SDH)是线粒体呼吸链的第一个酶,存在于所有有氧呼吸的细胞
超过一个月。如果一次无法用完一 瓶,可将40~45 ml 分装于无菌50 ml 离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10 %,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。 2.一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。 3.瓶装(500ml) 血清解冻步骤(逐步解冻法): -20℃ 或–70℃ 至4℃冰箱溶解一天,至室 温下全溶后再分装,一般 50 ml 无菌离心管可分装40~45 ml。在溶解过程中须规则
水浸洗三次,双蒸水泡24小时,晾干备用。 (四)包装:对细胞培养用品进行消毒前,要进行严密包装,以便于消毒和贮存。常用的包装材料:牛皮纸、硫酸纸、棉布、铝饭盒、较大培养皿等,近几年用铝箔包装,非常方便,适用。培养皿、注射器、金属器械等用牛皮纸包装后再装入饭盒内,较大的器皿可以进行局部包扎。 二、消毒和灭菌 微生物污染是造成细胞培养失败的主要原因 (一)物理消毒法 1、紫外线消毒:紫外线是一种低能量的电磁辐射,可杀死多种微生物。革兰阴性菌最为敏感,其次是阳性菌,再次为芽孢,真菌孢子的抵抗力最强
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