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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
25
- 英文名:
Citrate Antigen Retrieval Solution
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
100ml
5-Amino-2-mercaptobenzimidazole乙酸钴四水(>99.5%,BR) 分子式:C20H22O5 性状:Powder 纯度:%
4-Aminophthalimide钴粉(>99%,BR) 分子式:C20H20O5 性状:Powder 纯度:96.5%
3-Amino-4-hydroxybenzoic acid铜粉(>99.5%,BR) 分子式:C20H20O5 性状:Powder 纯度:95.0%
8-Aminoquinoline碱式碳酸铜(铜 纯度:52.5~56.5%) 分子式:C20H22O6 性状:Powder 纯度:97.0%
1-Amino-4-hydroxyanthraquinone氧化铜粉(>99%,BR) 分子式:C21H24O5 性状:Oil 纯度:93.0%
2-Amino-3-hydroxyanthraquinone焦磷铜 分子式:C21H24O5 性状:Oil 纯度:%
6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid酒石酸铜三水(>98%,BR) 分子式:C21H26O7 性状:Powder 纯度:98.0%
4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid2'-脱氧腺苷5'二磷酸三钠盐(>97%,BR) 分子式:C20H20O5 性状:Powder 纯度:%
Peri acid2'-脱氧胞苷-5'-二磷酸三钠盐(分子生物学级) 分子式:C26H34O11 性状:Powder 纯度:97.0%
中文名称:柠檬酸钠抗原修复液(50X)
英文名称:Citrate Antigen Retrieval Solution
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
本品是一种最常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用多、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。
本抗原修复液采用了广泛使用的柠檬酸钠缓冲液(pH6.0),可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
本产品特别适合用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片等其它样品。
一个包装的本产品可以配制成5000毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算,一个包装的本产品可以用于500个样品。
储存条件:4℃,有效期一年。
柠檬酸钠抗原修复液(50X) 使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
NIPSNAP2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
TEX37 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
TTBK2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CTSD rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
EXD2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
XPO1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
TGM7 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
TGM6 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
UGT8 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
ESPN rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
RAB25 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
DCBLD2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
RPA2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
PDP1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
CYP2W1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
柠檬酸钠抗原修复液(50X) 中文名称 转录因子OTX2抗体
别 名 CPHD6; Homeobox protein OTX2; MCOPS 5; MCOPS5; MGC45000; Orthodenticle 2; Orthodenticle homeobox 2; Orthodenticle homolog 2 (Drosophila); Orthodenticle homolog 2; Orthodenticle2; Otx 2; otx2; OTX2_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 发育生物学 神经生物学 干细胞 环指蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 32kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human OTX2 (15-105aa)
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
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文献和实验抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods
技术即可检测到特定抗原。 恢复表位免疫反应性的方法有很多种。即使是改变抗体稀释液的pH值或阳离子浓度这样简单的方法,也能影响抗体与其表位的亲和力。对于部分掩蔽的表位,在进行抗原修复之前,可以先尝试延长一抗的孵育时间。然而,这一步骤也需要进一步优化,包括合适的抗体浓度、孵育时间和温度。在讨论抗原修复方法时,通常将其分为两大类:蛋白酶诱导表位修复(PIER)和热诱导表位修复(HIER)。一旦优化,抗原修复的效果将非常显著。 蛋白酶诱导表位修复(PIER) 在PIER方法中,蛋白酶K、胰蛋白酶和胃
一、SP 法 1)脱蜡、水化;2)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;3)3% H2O2(80% 甲醇)滴加在 TMA 上,室温静置 10 分钟;4)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;5)抗原修复;6)PBS 洗 2~3 次各5分钟;7)滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8)滴加Ⅰ抗 50μl,室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9)4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10)PBS 洗 3 次各 5 分钟;11)滴加 Ⅱ 抗 40~50 μl,室温
不完全:使用正常山羊血清或 1%~5% BSA 封闭 1h。 (5)离子相互作用造成的背景:降低抗体稀释液的离子强度。 (6)切片或细胞过于干燥或孵育温度过高:实验过程中请保持切片处于湿润状态,一抗孵育时尽量使用 4℃ 过夜孵育。 (7)内源性过氧化物酶残余:适度延长内源性过氧化物酶阻断剂阻断时间。 (8)样本于缓冲液或抗原修复液中浸泡太久:样本在溶液中浸泡时间不要超过 24h。 Q4:为什么会出现非特异性染色,如何避免? (1)抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加非特异性染色:由于本试剂盒使用
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