- ¥1298
- KALANG/康朗生物
- KL-X118
- 中国/上海
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
One Step Seamless Cloning kit
- 保质期：
有效期 2个月
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
长时间储存于 2-8℃避光保存
- 规格：
20次
产品介绍：
Seamless Cloning(无缝克隆)技术提供了一种新的、高效快速的基因克隆方法， 一步法无缝克隆试剂盒不依赖于T4连接酶，不受载体和目的片段的酶切位点限制，而直接用重叠片段重组的方法，采用特殊的酶组合可以将任意方法线性化后的载体和与其两端具有16-25bp重叠区域的PCR片段定向重组连接，可以30分钟内实现平末端PCR产物片段高效定向无缝克隆至载体的任意位点。。
产品储存：
储存：－20℃ 保存，避免多次反复冻融。
产品特点：
1. 30分钟可以将一个50bp-15kb PCR扩增片段（平末端/A端）克隆定向插入任意载体的任意位置。
2.不受载体和插入片段酶切位点的可用性和平端/粘性末端的限制，可以在任意位点进行克隆。
3.无缝克隆，插入点不会引入不需要的碱基序列。
4.不依赖于连接酶及磷酸酶，高效，准确，克隆阳性率可达95%以上。
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文献和实验的产物是闭合载体，可以直接进入 Step 4 了。 · Step 4 · 转化感受态细胞或者 RCA 了。还有的产品甚至连后面的聚合酶和连接酶都不需要，克隆效率一样高还能避免填补缺口时的意外错配，强的。 因为整个过程不会引入额外的碱基，可在预定位置精准插入外源片段，因此亦有无缝克隆，无痕克隆的美誉。这个方法还可以实现一步完成多个片段连续组装，只要设计 PCR 引物让相邻片段之间具有 15-30 个碱基的同源序列重叠，就可以实现单管一步反应，完成组装，而且还成功率高，保真度高，能大大减少重复
-PCR Kit（高效一步RT-PCR试剂盒） 15、DNA Blunting Kit（DNA平端化-连接试剂盒） 16、Nova T4 DNA Ligase 17、Nova Rapid Ligating Kit（Nova快速DNA连接试剂盒） 18、One-Step Competent Cell Prep Kit（一步法感受态细胞快速制备试剂盒） 19、Random Primer Labeling Kit（随即引物标记试剂盒） 20、T7 RNA Polymerase 21
Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆
[ 1，2 ] ( 在 Qiagen 的质粒 pEQ-32 的基础上构建而成，F [ 1，2 ] 代表 DHFR 片段 1 )。 ( 2 ) 质粒 pREP4 ( 携带 lac 抑制基因和卡那霉素抗性筛选标记。含有利用质粒 PQE-32 表达的蛋白质的细胞，正如本实验所用的，必须带有此质粒以控制 PQE-32 质粒上 lac 启动子的泄漏表达）（Qiagen 产品）。 ( 3 ) 连接：T4 DNA 连接酶（Fermentas) 和 ATP ( Pharmacia)。 ( 4 ) SS320 电转感受
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