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北京百奥莱博科技有限公司
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10ml
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产品名称:封闭兔血清正常(原液)
产品货号:QS088
产品规格:10ml
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文献和实验免疫印迹(Western Blotting)的基本原理及应用 免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术,在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物,然后利用抗原-抗体的特异性反应,从蛋白混合物中检测出目标蛋白,从而定量或定性的确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况。Western blotting还可用于蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后续分析,作为一种廉价、便捷、可靠的研究工具,将与质谱和蛋白质芯片等技术一起在蛋白质组时代发挥重要作用
1、原理兔红细胞不经致敏可激活人补体旁路途径,导致兔红细胞溶解。在反应系统中加入乙二醇双氨基四乙酸(ethyleneglycol-bis-aminotetracetate,EGTA)可和血浆Ca2+螯合,EGTA与Mg2+结合能力很弱,故经典途径被封闭。根据兔红细胞的溶血程度,可测定补体旁路途径的总补体活性。2、所需主要试剂(1)兔红细胞(rabbitredbloodcell,RRBC)悬液的制备 无菌采兔耳静脉或心脏血,用阿氏液抗凝,分装,4℃保存。可用1周左右。试验时取一定量的RRBC
沉淀剂降解,部分不稳定的Fc区导致更多在正常情况下隐藏在蛋白质内部的疏水基团暴露。因此,不管那种蛋白质与NC膜的结合机理被接受,由于采用共沉淀剂增加的蛋白质疏水性将提高蛋白质与NC膜的结合能力。 图6 采用不同缓冲液以1mg/ml 鼠IgG划线的检测结果 最常用的共沉淀剂时醇类,醇类有许多理由值得推荐。醇类的存在有助于NC膜的重湿润,减少NC膜可能带有的静电,而可以降低溶液中的蛋白质稳定性。在基于膜的免疫分析中,3-5%的甲醇可以极大地提高检测性能。 在几年前,将醇类提高蛋白质与固相载体的结合
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