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文献和实验N2 supplement的配置和N2 Supplement操作手册
of 100 ml medium add 1 ml N2 Supplement (100x) into 99 ml of the appropriate base medium. Cell culture vessels must be coated with poly-D-lysine (0.05 mg/ml). Fibronectin must be added at a final concentration of 5-10 μg/ml directly
trypsin后1000rpm离心3min。将trypsin吸走。2。每次subcuture时候不用trypsin,和PBS,直接用medium把贴壁的细胞吹下来吹成单个的再长。我用的是后面一种,效果非常好。细胞很健康!PC12健康与否的判断方法(是我自己总结的):没有加NGF时,如果细胞很健康,会长出很短的小轴突,整体圆圆的,很可爱。 当它不健康时,你会发现,1,细胞不易贴壁了,会漂很多。2。细胞会呈现椭圆形,轴突变长(这时的细胞其实状态已经不好了,即使贴壁也不行!)PC12细胞间的聚集成团问题 丁香
(分子量为15-30万) ,我们用的是sigma P7890,效果还不错。 丁香园sweet的问题: 我打算养pc-12 ,听说这个细胞很难伺候,请教培养方法。何种培养基好?NGF的种类有讲究吗? 丁香园lrmoon的观点: PC12细胞我养过,谈一谈体会,希望对您有帮助。 总体上PC12细胞不难养,不要有畏惧思想。 1.Medium:DMEM加2.5%FBS, 15%horse serum(都用Gibco的) 2.复苏后首次分皿时经消化后尽量用tip头柔和吹打15次,使成
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