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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
114
- 英文名:
Intracellular pH fluorescence probe
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50微升
特别提示:包括细胞内pH荧光探针(BCECF AM)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:细胞内pH荧光探针(BCECF AM)
英文名称:Intracellular pH fluorescence probe
产品货号:YT357
产品规格:50微升
本品是最常用的检测细胞内pH的荧光探针,用于细胞内pH检测时,常用的BCECF AM的浓度为1-10μM。本BCECF AM(pH荧光探针)是配制于无水DMSO(anhydrous DMSO)中的储存液,浓度为5mM。
BCECF AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。BCECF AM没有荧光,进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成BCECF,从而被滞留在细胞内。BCECF在适当的pH值情况下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和发射波长因pH的不同而有所不同,最大激发波长大致在503nm左右,最大发射波长大致在520nm左右,实际检测时推荐使用的激发波长为488nm,发射波长为535nm。BCECF在不同pH条件下的发射光谱参考下图。
BCECF AM不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究,也有报道用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的细胞内pH水平检测。在有细胞内pH变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中BCECF AM被广泛应用。
注意事项:
1. BCECF AM(pH荧光探针, 5mM)可能对人体有害,请注意适当防护。
2. 本BCECF AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
我公司销售的细胞内pH荧光探针(BCECF AM)报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验(一)BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。加入BCECF-AM(终浓度1~5μmol/L),37℃孵育30~60min。PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。激光扫描共聚焦显微镜观察。 (二)SNARF-1定量比率测定pH值 1. 储存液配制 SNARF溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光
体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、SNAFL-calcein)、BCECF等,这些探针均为疏水性探针,须使用其AM形式。FITC-dextran则适用于pH范围4~6之间,如溶酶体pH的检测,该探针也不能透过质膜,但可通过细胞胞饮作用进入溶酶体,因此应选择分子量稍小的Dextran(葡聚糖)。 5. 细胞内
将各光学切片的数据组合成一个真实的三维图像,并可从任意角度观察,也可以借助改变照明角度来突出其特征,产生更生动逼真的三维效果。 4. 动态荧光测定 Ca2+、pH 及其它细胞内离子测定,利用ACAS能迅速对样品的点,线或二维图像扫描,测量单次、多次单色、双发射和三发射光比率,使用诸如Indo-1、BCECF 、Fluo-3等多种荧光探针对各种离子作定量分析。可以直接得到大分子的扩散速率,能定量测定细胞溶液中Ca2+对肿瘤启动因子、生长因子及各种激素等刺激的反应,以及使用双荧光探针Fluo
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