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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
49
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
50T
英文名称:
产品规格:50T
发货周期:1~3天
用途:
神经HRP示踪DAB(四甲基联)显色。
注意事项:
主要由DAB孵育液、乙酸钠缓冲液等组成,染色后呈棕色。
储存条件:-20℃,避光,12个月
神经HRP示踪显色液(DAB法)使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
Piccolo蛋白Elisa检测试剂盒 4-Amyloxybenzaldehyde 质量规格:>98.0%(GC)
Pim-1原癌基因Elisa检测试剂盒 4'-(trans-4-Amylcyclohexyl)biphenyl-4-carbonitrile 质量规格:>98.0%(GC)
Pim-2原癌基因Elisa检测试剂盒 4,4'-Dinonyloxyazoxybenzene 质量规格:
Pim-3原癌基因Elisa检测试剂盒 4,4'-Di-n-octyloxyazoxybenzene 质量规格:>95.0%(N)
Pirin蛋白Elisa检测试剂盒 4,4'-Dibutoxyazoxybenzene 质量规格:
PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶Elisa检测试剂盒 Oleic acid 质量规格:分析标准品,≥99.0%(GC)
PL7抗体/抗苏氨酰tRNA合成酶Elisa检测试剂盒 Nonadecanoic Acid 质量规格:分析标准品,≥99.5% (GC)
Podocan蛋白Elisa检测试剂盒 4,4'-Diamyloxyazoxybenzene 质量规格:>95.0%(N)
Podocin蛋白Elisa检测试剂盒 4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene 质量规格:>96.0%(N)
POLQ样蛋白解旋酶Elisa检测试剂盒 Diethyl Azoxybenzene-4,4'-dicarboxylate 质量规格:>97.0%(GC)
Polybromo1蛋白Elisa检测试剂盒 4-Octylphenyl Salicylate 质量规格:>95.0%(GC)
Polycomb组环指蛋白4Elisa检测试剂盒 Butyl 4-Carboxyphenyl Carbonate 质量规格:>98.0%(T)
POTE锚蛋白域家族成员GElisa检测试剂盒 Amyl 4-(4-Ethoxyphenoxycarbonyl)phenyl Carbonate 质量规格:>95.0%(HPLC)
Preptin蛋白Elisa检测试剂盒 Cholesterol Hexyl Carbonate 质量规格:
Prestin蛋白Elisa检测试剂盒 Cholesterol n-Octyl Carbonate 质量规格:
肌醇CYP4A11 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
牛胰岛素DEDD2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
碘硝基四唑紫嘌呤BSPRY rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
碘代乙酰胺VPS50 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
P2RX2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
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文献和实验过氧化物酶 DAB 法 过氧化物酶(peroxidase)与细胞 色素氧化酶具有相似的化学本质,是一类氧化还原酶,可使过氧化氢(H2 O2 )分解生成水和释放氧。过氧化物酶广泛分布于乳腺、甲状腺、唾液腺、肠上皮、血细胞和肥大细胞等。存在于细胞过氧化物酶体中,是机体的抗氧化酶,在防止氧代谢物损伤中具有重要作用。显示过氧化物酶常用联苯胺法。联苯胺如DAB和四甲基联苯胺(3,3,5,5,―tetramethyl benzidine,TMB)能被过氧化物酶分解过氧化氢产生的氧所氧
因为要用神经逆行示踪剂,文献中提到比较多是固蓝,英文名字fast blue,于是就购买了,但不是我经手买的,买的是fast blue bb salt,和另外一种示踪剂碳化青(DiI),一同使用。使用中发现,后者很好溶解,用来标示神经效果很好,但是这个固蓝,一是溶解不了,用文章中提到的双蒸水、酒精、DMSO都不行,二是不能激发荧光,即使是新拿出来的颗粒,放在荧光显微镜下也是什么都没有。回头再查,发现,固蓝有很多种类,包括固蓝
化物酶,然后用PBS洗涤三次,每次 5min。4 ) 加入一抗(用3%BSA-PBS封闭液1:50稀释一抗),37℃湿盒孵育1h。5 ) 加入Post-blocking室温湿盒孵育30min,然后用PBS洗涤三次,每次5min。6 ) 加入稀释好的辣根过氧化物酶(HRP)标二抗,室温下湿盒孵育30min。7 ) 用PBS洗涤玻片5次,每次5min。8 ) 按照DAB试剂盒说明添加显色液,避光显色30s-5min。用蒸馏水终止显色反应。9 ) 苏木精进行复染色3min,用蒸馏水冲洗。10
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