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ER2738感受态细胞

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      ER2738感受态细胞

    细胞名称:    ER2738, ER2738感受态细胞, ER2738菌株

    菌株类型:    E.coli

    培养基:    LB培养基

    生长条件:    37 ℃,  有氧

    基因型:    F´proA+B+ lacIq Δ(lacZ)M15 zzf::Tn10(TetR)/ fhuA2 glnV Δ(lac-proAB) thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5

    抗  性:    四环素

    质粒转化条件:    电转化

    应   用:      噬菌体展示蛋白表达,可以用于M13噬菌体工作,普通的质粒克隆,能够利用蓝白斑筛选,也可以用于蛋白表达。

    菌株特点:    ER2738感受态细胞具有四环素抗性,ER2738感受态细胞主要用于噬菌体展示的研究工作。

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      的试管中,挑选新鲜的大肠杆菌ER2738单菌落,37℃、230r/min振荡培养过夜,将2m1ER2738培养液转入20m1 LB溶液中继续培养50min,然后37℃、100r/min振荡培养15min,即成为感受态细胞。加入噬菌体后,继续37℃、100r/min培养10min,再转到37℃、230r/min的条件下继续培养4.5h,培养物于4℃、8 000r/min离心15min,取上清液加入1/6体积的PEG―NaCl于4℃沉淀过夜。将溶液于4℃、10 000 r/min离心20min,弃

    • NEB的M13噬菌体

      噬菌体: M13KE T7宿主细胞 : ER2738 BL21/BLT5403/BLT5615噬菌体释放方式: M13噬菌体溶源性,不裂解宿主菌。极大地简化了每轮淘选过程中的噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法即可。 T7是裂解性的,其展示的蛋白不需分泌。这一优点使更多的序列可能被展示。 但不利于提纯。融合方式:M13噬菌体N端与pIII蛋白融合,不适合克隆cDNA,因为cDNA中为oligo d(T))常位于翻译终止密码子的下游。T7噬菌体C端与T7基因10 衣壳

    • pfu及噬菌体滴度测定

      pfu指的是噬菌体的空斑形成单位。以下是关于测定M13效价的一个方法:测定噬菌体滴度只有当噬菌体的感染复度MOI (multiplicity of infection)值远低于1时(即细胞过量时),噬菌斑的数量才会随着加入噬菌体的量而呈线性增加。正因如此,建议检测噬菌体贮液的滴度时,在感染前进行稀释,而不是在高MOI值的情况下稀释被感染的细胞。低MOI值有助于确保每个噬菌斑仅含一个DNA序列。1. 接种ER2738单菌落于5-10 ml LB培养基中,摇床培养至对数中期(OD

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