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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
302
- 英文名:
JM110?Chemically Competent Cell
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
- 规格:
10×100μl/50×100μl
特别提示:包括JM110化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:JM110化学感受态细胞
英文名称:JM110?Chemically Competent Cell
产品货号:MQ0007
产品规格:10×100μl/50×100μl
JM110菌株具有硫酸链霉素抗性(StrR);是甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株,提取得到的质粒DNA,可被对dam、dcm甲基化敏感的内切酶切割;lacIq lacZΔM15的存在使JM110可以进行蓝白斑筛选,但转化效率不高,JM110感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率约107 cfu/μg。一般不用于质粒构建,只适用于质粒转化。
保存条件:-80℃
基因型:
rpsL(Str R)thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB)/F′[traD36 proAB lacIq lacZΔM15]
操作说明:
1.JM110感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
我公司销售的JM110化学感受态细胞现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征
【交流】转载:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别
就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征 Xl1-Blue菌株 基因型:endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK
dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征 Xl1-Blue菌株 基因型:endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F
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