IgG Fab切割酶II北京厂家

特别提示：包括IgG Fab切割酶II在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：IgG Fab切割酶II
英文名称：FabCutter II Protease
产品货号：JN0167
产品规格：1000U|5000U

  本酶是一种新型的Fab"切割酶，通过多步纯化获得。该酶能对人、鼠、绵羊等物种不同亚型的免疫球蛋白IgGs进行快速单位点酶切。增加酶的浓度和延长酶切时间，该酶也可以对小鼠的IgG2a 和 IgG3进行切割。该酶的酶切位点位于免疫球蛋白IgG铰链区的下方，酶切产物为2个F（ab"）片段和Fc片段。与木瓜蛋白酶，无花果蛋白酶，胃蛋白酶等相比，FabCutter II Protease具有酶切位点单一，切割快速等优点。
FabCutter II Protease在生理条件下发挥酶切作用，保持抗体的免疫活性。该酶在pH6.0-8.0之间都具有活性（表一），最适酶切温度为37℃，常温下延长酶切时间也可达到同样的酶切效果。

活性定义：在10mM PB，137mM NaCl, 2.7mM KCl， pH 7.4的反应体系内，37℃反应30min，一个单位的酶能将1μg的人源IgG切割95%以上。

应用实例：

One unit cleaves ≥ 95% of 1μg human IgG1 when incubated in 10mM PB,137mM NaCl,2.7mM KCl，pH 7.4 at 37℃ for 30 min as monitored by SDS-PAGE。
1: Human IgG；
2: Human IgG cleaved by FabCutter II protease；
M: Protein Marker。

表一：可供选择的反应缓冲液及pH

兼容 Buffers	pH
PBS	6.0-8.0
MES Buffer	5.5-6.5
HEPES Buffer	7.0-8.0
Ammonium Bicarbonate Buffer	6.0-7.0
Sodium Acetate Buffer	6.0

*pH值低于5，会造成酶不可逆失活；pH值高于8.0，需要优化反应条件。

溶解方法：
1、溶解前低速离心，使冻干粉末聚集于管底。
2、用无菌ddH2O溶解，1000U酶加入20μl无菌ddH2O，5000U酶加入100μl无菌ddH2O，配制成酶活性为50U/μl的溶液。
3、低速离心，使溶液汇聚于管底。

操作方法：
1、按照溶解说明将冻干粉溶解，配制成为50U/μl的溶液。
2、待酶切的抗体溶解在反应缓冲液里，建议浓度为0.5-10mg/ml。
3、按照1U酶切1μg IgG的量将酶加到反应缓冲液里。
4、37℃酶切30min，取部分样品跑SDS-PAGE检测切割效果。
注：可使用本品中的Human IgG抗体做为底物测试酶切效果，用70μl ddH2O配制成1mg/ml的蛋白溶解，取50μl加入1μl的酶。酶切前后取样跑SDS-PAGE。

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