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细胞核染料PI染色液(即用型)

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  • 上海一研
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  • 2025年12月08日
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      详见说明书

    • 供应商

      上海一研

    • 保存条件

      低温

    • 规格

      10ml|50ml

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    中文名称:细胞核染料PI染色液(即用型)
    英文名称:

    产品规格:10ml|50ml
    发货周期:1~3天
    荧光标记是研究细胞凋亡的最基本方法。细胞凋亡的形态学变化及生化学变化都可以通过荧光标记的的方法而检测出来,从而区别鉴别出正常细胞、坏死细胞或检测细胞周期。
    碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种DNA 结合性染料,其激发和发射波长分别为536nm 和617nm,产生红色荧光,但无膜通透性,不能透过活细胞膜,只能染死细胞。因此,在荧光显微镜下观察,正常细胞不能着色,坏死细胞呈强红色荧光。采用流式细胞仪检测细胞周期时,凋亡细胞因内源性核酸酶被激活,使DNA 广泛降解、断裂,DNA 结构发生剧变,随着凋亡的进程,DNA 断裂产生的小分子量DNA 溢出胞外,细胞总DNA 量降低,于正常G0/G1 细胞群前出现一DNA 低染细胞群,即G1 峰前出现亚二倍体峰(sub-G1)或称A0 细胞群,即凋亡细胞群。用本试剂盒的PI 直接对细胞DNA 染色后,进行流式细胞仪分析,即可检测到凋亡细胞DNA 的变化。
    储存:2-8℃,避光,有效期6个月。


    产品细节图片1
    细胞核染料PI染色液(即用型)使用注意事项
    1. 微量试剂取用前请离心集液。
    2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
    3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
    4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
    5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
    6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
    7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
    使用说明 
        1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。 
        2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。 
        3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物; 
        4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;   
        5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。  
        6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
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