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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
52
- 英文名:
Cell Apotosis DNA Ladder Detection Kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
20T|50T|100T
英文名称:Cell Apotosis DNA Ladder Detection Kit
产品规格:20T|50T|100T
发货周期:1~3天
本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本)。细胞核染色质DNA 断裂是细胞凋亡的标志特征。在细胞发生凋亡时,核酸内切酶被激活,选择性降解染色质DNA,形成50-300 kb 的大片段,并进而在核小体连接处断裂,形成180-200 bp 或其整倍数的DNA片段,这些DNA 片段可从细胞中提取出来,通过琼脂糖凝胶电泳,溴化乙啶染色呈现为梯状条带(DNALadder),并据此判断细胞凋亡产生。我司细胞凋亡DNA Ladder 检测试剂盒提供了一种简便、快速地提取染色质DNA 的方法,并增加对小片段DNA 的回收,从而增强了检测的敏感性。
注意事项
1. DNA Ladder 出现在细胞凋亡晚期,观察细胞形态已发生皱缩出芽,染色质完全凝聚,细胞核已固缩断裂的凋亡晚期形态,建议该种形态的凋亡细胞比例在30%以上时进行DNA Ladder 检测或先进行Tunel检测.
2. DNA Ladder 出现在一个较短的时间段,在凋亡早期取样,则无DNA 降解的条带,而在凋亡末期取样则产生与细胞坏死相似的DNA 弥散条芾。因此取样时间需根椐不同种类的细胞和诱导剂而摸索确定。
3. 贴壁细胞最好不用胰酶消化而用细胞刮收集。
4. 某些细胞不产生这种核小体间的DNA 断裂,而是产生50-300kb 的大片段断裂。
细胞凋亡DNA Ladder检测试剂盒使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
6号染色体开放阅读框106抗体英文全称Interleukin 4 receptor英文简称IL4R;CD124检测范围1195nmol/L-10ng/ml
6号染色体开放阅读框115抗体英文全称Adenovirus IgM英文简称ADV-IgM检测范围1196nmol/L-400ng/mL
6号染色体开放阅读框123抗体英文全称Glutathione peroxidase 3英文简称GPX3检测范围1197nmol/L-1000μIU/ml
6号染色体开放阅读框129抗体英文全称hypoxia-inducible factor2英文简称HIF2检测范围1198nmol/L-4000pg/ml
6号染色体开放阅读框132抗体英文全称LDL immune complexes英文简称LDL-IC检测范围1199nmol/L-40mmol/L
6号染色体开放阅读框136抗体英文全称Egl nine homolog英文简称EGLN检测范围1200nmol/L-2000pg/ml
6号染色体开放阅读框138抗体英文全称Ebv IgG antibody英文简称Ebv IgA检测范围1201nmol/L-
6号染色体开放阅读框145抗体英文全称prolyl hydroxylase2英文简称PHD2检测范围1202nmol/L-40ng/ml
6号染色体开放阅读框97抗体英文全称rubella virus IgG英文简称RV IgG检测范围1203nmol/L-
补体C7抗体英文全称Mumps Virus IgG英文简称MU IgG检测范围1204nmol/L-
7号染色体开放阅读框45抗体英文全称NF-M英文简称NF-M检测范围1205nmol/L-4000pg/ml
8号染色体开放阅读框37抗体英文全称phosphorylation英文简称P tau检测范围1206nmol/L-800pg/mL
8号染色体开放阅读框45抗体英文全称mumps virus IgM英文简称MV-IgM检测范围1207nmol/L-
8号染色体开放阅读框80抗体英文全称varicella-zoster virus IgM antibody英文简称VZV-IgM检测范围1208nmol/L-
6号染色体开放阅读框163抗体英文全称RNA-binding protein 8英文简称RBM8检测范围1209nmol/L-8ng/mL
CD20 单克隆抗体CD20 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
CD23 单克隆抗体CD23 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
CD68 单克隆抗体CD68 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
CK19 单克隆抗体CK19 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
p53 单克隆抗体p53 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
NFkB p65 单克隆抗体NFkB p65 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
细胞凋亡DNA Ladder检测试剂盒Rhizoma paridis重楼染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 AFAP1L2抗体别 名 KIAA1914; XB130; Actin filament-associated protein 1-like 2; AF1L2_HUMAN; AFAP1-like protein 2; afap1l2.研究领域蛋白分子量 predicted molecular weight: 90kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AFAP1L2
Fructus leonuri茺蔚子染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 蛋白BOC抗体别 名 Boc homolog (mouse); Brother of CDO; Protein BOC; brother of CDO precursor; Protein BOC; BOC_HUMAN.研究领域 发育生物学 神经生物学 干细胞 细胞表面分子 细胞膜蛋白蛋白分子量 predicted molecular weight: 121kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Protein BOC
Bulbus fritillariae cirrhosae川贝母染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 B淋巴细胞淋巴瘤因子9抗体别 名 B-cell CLL/lymphoma 9; BCL 9; BCL-9; DLNB11; Le homolog; B-cell CLL/lymphoma 9-like; LGS; BCL9_HUMAN.研究领域 肿瘤 细胞生物 染色质和核信号 转录调节因子 淋巴细胞 b-淋巴细胞蛋白分子量 predicted molecular weight: 149kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BCL9
Fructus toosendan川楝子染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 肿瘤转移抑制蛋白BAMBI抗体别 名 BAMBI; BAMBI_HUMAN; BMP and activin membrane bound inhibitor homolog; BMP and activin membrane-bound inhibitor homolog; NMA; Non metastatic gene A protein; Non-metastatic gene A protein; Putative transmembrane protein NMA.研究领域 肿瘤 干细胞 生长因子和激素 细胞表面分子蛋白分子量 predicted molecular weight: 27kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BAMBI
Radix cyathulae川牛膝染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 胆汁酸盐输出泵/ATP结合盒转运蛋白11抗体别 名 ABC member 16, MDR/TAP subfamily; ABCB1; Abcb11; ABCBB_HUMAN; ATP binding cassette sub family B (MDR/TAP) member 11; ATP binding cassette sub family B member 11; ATP-binding cassette sub-family B member 11; Bile salt export pump; BRIC2; Bsep; PGY4; progressive familial intrahepatic cholestasis 2; Sister of P glycoprotein; Spgp.研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 转运蛋白 新陈代谢蛋白分子量 predicted molecular weight: 146kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BSEP/ABCB11
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文献和实验例一 gongyulai :我用的是药物诱导癌细胞凋亡,做DNA Ladder(用的是北京鼎国的动物细胞凋亡梯子提取试剂盒)。跑出来的电泳不是一条条带,而是每条很长的拖尾现象,Marker到是出来了。我是按说明书上0。8%的琼脂糖。我用的是60v电压。不知道什么原因?郁闷。说明书上说混合温和是什么意思,我又没用力摇。我还想问收集凋亡细胞时离心时转速多少比较好?chujun_hust :(1)“跑出来的电泳不是一条条带,而是每条很长的拖尾现象”: 可能是由于你点样时,时间太长了,导致样品扩散
一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
EDTA) for 10 minutes at 100 V. 2) To 3 μg (3 μl) of ladder, add loading buffer (recommended final loading buffer concentration is 20 mM MOPS; pH 7.0, 6% w/v formaldehyde, 31% v/v deionized formamide, 1 mM EDTA, 0.0125% xylene cyanol
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