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- 详细信息
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23
- 英文名：
DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column
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详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温
- 规格：
50次
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中文名称：细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)
英文名称：DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column
产品规格：50次
发货周期：1～3天
本试剂盒是目前的DNA Ladder抽提试剂盒之一。本试剂盒是针对细胞凋亡过程中产生的核小体间DNA链断裂而设计的。可以非常有效地抽提最小片段为180-200bp的DNA ladder，同时又可以抽提到最大50kb左右的基因组DNA。本试剂盒可以抽提50个样品。
DNA ladder也称DNA fragmentation，是细胞凋亡的一个重要指标。通常观察到DNA ladder，就可以判定细胞发生了凋亡。
样品首先被蛋白酶K消化，随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液，然后加入到纯化柱内。通过高速离心，使DNA在穿过纯化柱的瞬间，结合到纯化柱上，随后通过两次洗涤去除各种杂质，最后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，样品裂解后仅需约15分钟即可完成。
通过DNA纯化柱方式抽提DNA ladder比用传统的酚氯仿抽提酒精沉淀方法更加便捷，小片段DNA不容易损失。试剂盒提供了RNase A，可以获得不含RNA的高纯度总DNA，排除了RNA对DNA ladder观察造成的干扰。
本试剂盒每次最多可以抽提20mg组织或200-350万个培养细胞。样品用量过多，反而会影响抽提效果。纯化柱对于DNA的最大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA，每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA，每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA，每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA。样品的用量请勿超过纯化柱的容量，样品用量最好能保持在纯化柱容量的70%或以下。当然过少的样品也不利于检测到DNA ladder。
对于培养细胞的凋亡检测，通常6孔板一个孔的细胞就足够用于DNA ladder的抽提和检测。
试剂盒组份：
样品裂解液A——————10ml
样品裂解液B——————11ml
洗涤液I——————21ml(第一次使用前加入7ml无水乙醇)
洗涤液II——————16ml (第一次使用前加入24ml无水乙醇)
洗脱液——————22ml
蛋白酶K——————1.1ml
RNase A——————220μl
DNA纯化柱及废液收集管——————50套
储存条件：室温，有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)
细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
载脂蛋白C1抗体英文全称G Protein Coupled Receptor 32英文简称GPCRGPR32检测范围145nmol/L-2000pg/mL
载脂蛋白C2抗体英文全称Immunodeficiency Virus Type 1 p24英文简称HIV-1 P24检测范围146nmol/L-8ng/mL
载脂蛋白L1抗体英文全称HLA-DQA1英文简称HLA-DQA1检测范围147nmol/L-32ng/mL
载脂蛋白L4抗体英文全称HLA-DPA1英文简称HLA-DPA1检测范围148nmol/L-800pg/mL
载脂蛋白L5抗体英文全称HLA-DPB1英文简称HLA-DPB1检测范围149nmol/L-800pg/mL
载脂蛋白M抗体英文全称HLA-DR4英文简称HLA-DR4检测范围150nmol/L-800pg/mL
载脂蛋白O抗体英文全称H-ras英文简称H-ras检测范围151nmol/L-8ng/mL
β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白1抗体英文全称IFN-γR1-CDw119英文简称IFN-γR1-CDw119检测范围152nmol/L-800pg/mL
共济失调性眼球运动功能丧失相关蛋白AOA1抗体英文全称KIT Ligand英文简称KITLG检测范围153nmol/L-800pg/mL
腺嘌呤磷酸核糖转移酶抗体英文全称L1 cell adhesion molecule英文简称L1CAM检测范围154nmol/L-16ng/mL
磷酸化水通道蛋白2抗体英文全称Laminin-5;Epiligrin英文简称Laminin-5;Epiligrin检测范围155nmol/L-8ng/mL
ADP核糖基化因子1抗体英文全称 Mac-2BP英文简称Mac-2BP检测范围156nmol/L-16μg/mL
ADP核糖基化因子5抗体英文全称MEK英文简称MEK检测范围157nmol/L-480pmol/L
ADP核糖基化因子结合蛋白抗体英文全称Mesoderm-specific transcript homolog protein英文简称MEST检测范围158nmol/L-120ng/mL
ADP核糖基化因子GTP酶激活蛋白1抗体英文全称microRNA-210英文简称miR-210检测范围159nmol/L-120ng/mL
细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)Radix angelicae dahuricae白芷PCR鉴定试剂盒 中文名称 锚定蛋白重复结构域蛋白激酶ANKK1抗体别 名 Ankyrin repeat and kinase domain containing 1; Ankyrin repeat and protein kinase domain containing protein 1; EC 2.7.11.1; PKK2; Protein kinase PKK2; SGK288; Sugen kinase 288; X kinase; ANKK1_HUMAN.研究领域 信号转导 细胞凋亡 细胞分化蛋白分子量 predicted molecular weight: 85kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ANKK1
Rhizoma atractylodis macrocephalae 白术PCR鉴定试剂盒 中文名称 膜粘连蛋白11抗体别 名 56 kDa autoantigen; Annexin A11; Annexin XI; Annexin-11; AnnexinA11; AnnexinXI; ANX 11; ANX A11; ANX11; ANX11_HUMAN; ANXA 11; ANXA11; Autoantigen 56 kD; Calcyclin associated annexin 50; Calcyclin-associated annexin 50; CAP 50; CAP-50; CAP50; OTTHUMP00000059806.研究领域 细胞生物 信号转导 通道蛋白 细胞粘附分子 细胞膜蛋白蛋白分子量 predicted molecular weight: 54kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Annexin A11
Seman platycladi柏子仁PCR鉴定试剂盒 中文名称 膜粘连蛋白13抗体别 名 Annexin A13; Annexin XIII; Annexin, intestine-specific; Annexin-13; ANX 13; ANX A13; ANX13; ANX13_HUMAN; ANXA13; Intestine Specific Annexin; Intestine-specific annexin; ISA; MGC150460.研究领域 细胞生物 信号转导 通道蛋白 细胞粘附分子 细胞膜蛋白蛋白分子量 predicted molecular weight: 35kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Annexin A13
Herba lobeliae chinensis半边莲PCR鉴定试剂盒 中文名称 转录因子AP2α+β抗体别 名 Activating enhancer binding protein 2 alpha; Activating enhancer binding protein 2 beta; AP2TF; TFAP2; TFAP2A; TFAP2B; Transcription factor AP2 alpha; Transcription factor AP2 beta; AP2A_HUMAN; AP2B_HUMAN.研究领域 肿瘤 发育生物学 转录调节因子 结合蛋白 细胞分化 表观遗传学蛋白分子量 predicted molecular weight: 48kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AP2 alpha + beta
Radix isatidis板蓝根PCR鉴定试剂盒 中文名称 细胞周期后期促进蛋白亚基10抗体别 名 ANAPC 10; anapc10; Anaphase promoting complex 10; Anaphase promoting complex subunit 10; Anaphase-promoting complex subunit 10; Apc 10; APC10; APC10_HUMAN; Cyclosome subunit 10; DKFZP564L0562; Doc 1; Doc1; OTTHUMP00000220297; OTTHUMP00000220298; OTTHUMP00000220299; OTTHUMP00000220300; OTTHUMP00000220303.研究领域 细胞生物 细胞周期蛋白 泛素蛋白分子量 predicted molecular weight: 21kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human APC10
LB-Top Agar250克LB-Top Agar大肠杆菌增殖
LB营养琼脂250克LB Nutrient Agar用于发酵工程、基因工程和分子生物学中大肠杆菌的培养
LB Lennox肉汤250克LB Lennox Broth大肠杆菌增殖
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匹克氏肉汤基础A250克Pick，s Broth Base A溶血性链球菌的增菌培养
匹克氏肉汤基础B250克Pick，s Broth Base B一次性使用卫生用品中溶血性链球菌的检验
中文名称：细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)
英文名称：DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column
产品规格：50次
发货周期：1～3天
本试剂盒是目前的DNA Ladder抽提试剂盒之一。本试剂盒是针对细胞凋亡过程中产生的核小体间DNA链断裂而设计的。可以非常有效地抽提最小片段为180-200bp的DNA ladder，同时又可以抽提到最大50kb左右的基因组DNA。本试剂盒可以抽提50个样品。
DNA ladder也称DNA fragmentation，是细胞凋亡的一个重要指标。通常观察到DNA ladder，就可以判定细胞发生了凋亡。
样品首先被蛋白酶K消化，随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液，然后加入到纯化柱内。通过高速离心，使DNA在穿过纯化柱的瞬间，结合到纯化柱上，随后通过两次洗涤去除各种杂质，最后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，样品裂解后仅需约15分钟即可完成。
通过DNA纯化柱方式抽提DNA ladder比用传统的酚氯仿抽提酒精沉淀方法更加便捷，小片段DNA不容易损失。试剂盒提供了RNase A，可以获得不含RNA的高纯度总DNA，排除了RNA对DNA ladder观察造成的干扰。
本试剂盒每次最多可以抽提20mg组织或200-350万个培养细胞。样品用量过多，反而会影响抽提效果。纯化柱对于DNA的最大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA，每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA，每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA，每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA。样品的用量请勿超过纯化柱的容量，样品用量最好能保持在纯化柱容量的70%或以下。当然过少的样品也不利于检测到DNA ladder。
对于培养细胞的凋亡检测，通常6孔板一个孔的细胞就足够用于DNA ladder的抽提和检测。
试剂盒组份：
样品裂解液A——————10ml
样品裂解液B——————11ml
洗涤液I——————21ml(第一次使用前加入7ml无水乙醇)
洗涤液II——————16ml (第一次使用前加入24ml无水乙醇)
洗脱液——————22ml
蛋白酶K——————1.1ml
RNase A——————220μl
DNA纯化柱及废液收集管——————50套
储存条件：室温，有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)
细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
载脂蛋白C1抗体英文全称G Protein Coupled Receptor 32英文简称GPCRGPR32检测范围145nmol/L-2000pg/mL
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载脂蛋白L4抗体英文全称HLA-DPA1英文简称HLA-DPA1检测范围148nmol/L-800pg/mL
载脂蛋白L5抗体英文全称HLA-DPB1英文简称HLA-DPB1检测范围149nmol/L-800pg/mL
载脂蛋白M抗体英文全称HLA-DR4英文简称HLA-DR4检测范围150nmol/L-800pg/mL
载脂蛋白O抗体英文全称H-ras英文简称H-ras检测范围151nmol/L-8ng/mL
β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白1抗体英文全称IFN-γR1-CDw119英文简称IFN-γR1-CDw119检测范围152nmol/L-800pg/mL
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