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- 文献和实验
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51
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详见说明书
- 供应商:
上海一研
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低温
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100T|50T
英文名称:
产品规格:100T|50T
发货周期:1~3天
凋亡早期的重要特征之一是半胱氨酸特异性蛋白酶——caspase家族蛋白的活性激活。这一类酶可以参与到一系列的生化反应中,响应凋亡早期信号并导致相应的蛋白底物剪切,继而引发细胞解体。目的底物可识别的序列包含天门冬氨酸残基,剪切发生在序列的羰基段。
Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒采用新型的荧光底物为原料,可以检测凋亡细胞中激活的caspase3/7.这种具有膜亲和型的检测试剂盒由一个4氨基的小肽(DEVD)和一种核酸结合染料。凋亡发生时,caspase3/7蛋白被激活,从而剪切caspase3/7识别序列DEVD肽段。剪切底物后,游离的核酸染料与DNA结合,从而发出亮绿色荧光信号。
操作步骤
1.1 以合适的培养基悬浮细胞或贴壁细胞,加入合适的化合物或药物,刺激细胞诱导凋亡。
1.2 去除药物或化合物,以新鲜培养基洗涤细胞2-3次,更换新鲜培养基后,以1μL/mL的量加入caspase3/7检测液,使得caspase3/7检测试剂工作液浓度为1μM。(注意: Caspase3/7 检测试剂工作液浓度为0.5μM~2μM,您根据细胞量以及培养液的体积进行调整优化。)
1.3 37℃,避光孵育30min,或室温孵育45-60min。
1.4 荧光显微镜观察拍照或荧光光度计读数。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
细胞角蛋白16抗体英文全称Testosterone Recipient英文简称TR检测范围1180nmol/L-100ng/ml
细胞分裂周期蛋白5样蛋白抗体英文全称Treponema pallidum英文简称TPI检测范围1181nmol/L-
钙粘蛋白23抗体英文全称Recombinant Nuclear Receptor Related Protein 1英文简称NURR1检测范围1182nmol/L-20ng/ml
细胞色素p450 2s1抗体英文全称Plasminogen activator inhibitor type 1英文简称PAIT1检测范围1183nmol/L-20ng/ml
c-fos抗体英文全称polymeric immunoglobulin receptor英文简称PIGR检测范围1184nmol/L-40ng/ml
6号染色体开放阅读框146抗体英文全称Netrin-4英文简称Netrin-4检测范围1185nmol/L-2000pg/ml
6号染色体开放阅读框154抗体英文全称anti-paternal cytotoxic antibody英文简称APCA检测范围1186nmol/L-16ng/mL
补体C5抗体英文全称Hantaan virus antibody IgM英文简称HVIgM检测范围1187nmol/L-12ng/mL
5号染色体开放阅读框19抗体英文全称Chlamydiapneumoniae IgM英文简称CDPIgM检测范围1188nmol/L-64ng/mL
5号染色体开放阅读框24抗体英文全称secretory carrier membrane protein 3英文简称SCAMP3检测范围1189nmol/L-2000pg/ml
5号染色体开放阅读框35抗体英文全称Uncoupling protein 1英文简称UCP 1检测范围1190nmol/L-200ng/ml
5号染色体开放阅读框42抗体英文全称her2-ecd英文简称her2-ecd检测范围1191nmol/L-100ng/ml
5号染色体开放阅读框45抗体英文全称secreted frizzled-related protein 3英文简称sFRP-3检测范围1192nmol/L-40ng/ml
5号染色体开放阅读框48抗体英文全称Protein-arginine deiminase type-2英文简称PADI2检测范围1193nmol/L-1200pg/ml
5号染色体开放阅读框49抗体英文全称Protein-arginine deiminase type-4英文简称PADI4检测范围1194nmol/L-8ng/ml
热休克蛋白70 单克隆抗体HSP70 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
半乳糖凝集素-3 单克隆抗体Galectin-3 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
表皮生长因子受体 单克隆抗体EGFR Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
人类表皮生长因子受体2 单克隆抗体HER2 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
CD45 单克隆抗体CD45 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
α甲基酰基辅酶A消旋酶 单克隆抗体AMACR Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒Semen plantaginis 车前子染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 α红细胞分化相关因子抗体别 名 AHSP; AHSP_HUMAN; Alpha hemoglobin stabilizing protein; Alpha-hemoglobin-stabilizing protein; EDRF; ERAF; Erythroid associated factor; Erythroid differentiation associated factor; Erythroid differentiation related factor; Erythroid differentiation-related factor; Erythroid-associated factor.研究领域 心血管 细胞生物 信号转导 干细胞蛋白分子量 predicted molecular weight: 12kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AHSP/ERAF
Pericarpium citri reticulatae陈皮染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 血管紧张素激活蛋白1抗体别 名 Angiotonin transactivated protein 1; ATP1; Chromosome 3 open reading frame 75; FLJ20211; Protein TMEM103; TMEM103; Transmembrane protein 103; UPF0405 protein C3orf75; ELP6_HUMAN.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学蛋白分子量 predicted molecular weight: 30kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ATP1/TMEM103
Lignum aquilariae resinatum沉香染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 脱氧胞苷脱氨酶蛋白抗体别 名 DNA dC->dU-editing enzyme APOBEC-3G; APOBEC-related cytidine deaminase; APOBEC-related protein; ARCD; APOBEC-related protein 9; ARP-9; CEM15; CEM-15; Deoxycytidine deaminase; ABC3G_HUMAN.研究领域 细胞生物 免疫学蛋白分子量 predicted molecular weight: 46kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human APOBEC3G
Semen phaseoli赤小豆染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 alpha 1肾上能受体B抗体别 名 ADA1B_HUMAN; ADRA1; ALPHA1BAR; Alpha-1B adrenergic receptor; Alpha-1B adrenoreceptor; Alpha-1B adrenoceptor; alpha-1B-adrenergic receptor; adrenergic, alpha-1B-, receptor.研究领域 神经生物学 通道蛋白 G蛋白偶联受体蛋白分子量 predicted molecular weight: 57kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ADRA1B
Radix paeoniae rubra赤芍染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 Alpha清蛋白抗体别 名 AFAM_HUMAN; Afamin; Afm; ALB 2; ALB2; ALBA; ALF; Alpha albumin; Alpha-Alb; Alpha-albumin.研究领域 心血管 细胞生物 免疫学 信号转导蛋白分子量 predicted molecular weight: 67kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AFM
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文献和实验过程中,都会发生分子信标与扩增产物结合,从而产生荧光,但这并不影响PCR的整个过程。并且只有能和分子信标结合的DNA模板得到扩增时才能产生荧光信号。所以荧光强度与特异性扩增产物的量成正比,它是模板被PCR扩增的直接标志。与常规的核酸检测方法相比,分子信标可以进行闭管操作,有效消除核酸的交叉污染,具有实时、定量、高灵敏度、高特异性等特点。 4.2 用于活体内核酸的动态检测 通过将分子信标注入活细胞内,使分子信标与特定的模板结合产生荧光。可以通过荧光显微镜实时、动态的检测整个过程。如可以用于细胞
波长590 nm进行荧光读取。最佳的读取可提供最大的动态范围、最佳的线性度以及最小的标准偏差。 3.对数据进行作图。 细胞增殖检测 用MTT细胞生长检测试剂盒(CT01)检测增殖情况,用AldeRed ALDH检测试剂盒(SCR150)分析醛脱氢酶 (ALDH)表达情况。 肿瘤干细胞表达醛脱氢酶(ALDH)水平升高。AldeRed™ ALDH检测试剂盒可使用ALDH红移荧光底物基于醛脱氢酶(ALDH)表达进行活肿瘤干细胞鉴定和分离,允许同时使用包括GFP细胞系在内的绿色荧光报告物。 1.
性极佳的低光探测及活细胞荧光定量分析。利用这一功能既可对单个细胞或细胞群的溶酶体,线粒体、DNA、RNA和受体分子含量、成份及分布进行定性及定量测定,还可测定诸如膜电位和配体结合等生化反应程度。此外,还适用于高灵敏度快速的免疫荧光测定,这种定量可以准确监测抗原表达,细胞结合和杀伤及定量的形态学特性,以揭示诸如肿瘤相关抗原表达的准确定位及定量信息。 3.2 定量共聚焦图像分析 借助于ACAS激光共焦系统,可以获得生物样品高反差、高分辨率、高灵敏度的二维图像。可得到完整活的或固定的细胞及组织的系列
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