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Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒

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  • 上海一研
  • EY-19075
  • 进口、国产
  • 2025年11月23日
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    • 供应商

      上海一研

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      低温

    • 规格

      100T|50T

    中文名称:Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒
    英文名称:

    产品规格:100T|50T
    发货周期:1~3天
    凋亡早期的重要特征之一是半胱氨酸特异性蛋白酶——caspase家族蛋白的活性激活。这一类酶可以参与到一系列的生化反应中,响应凋亡早期信号并导致相应的蛋白底物剪切,继而引发细胞解体。目的底物可识别的序列包含天门冬氨酸残基,剪切发生在序列的羰基段。
    Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒采用新型的荧光底物为原料,可以检测凋亡细胞中激活的caspase3/7.这种具有膜亲和型的检测试剂盒由一个4氨基的小肽(DEVD)和一种核酸结合染料。凋亡发生时,caspase3/7蛋白被激活,从而剪切caspase3/7识别序列DEVD肽段。剪切底物后,游离的核酸染料与DNA结合,从而发出亮绿色荧光信号。
    操作步骤
    1.1 以合适的培养基悬浮细胞或贴壁细胞,加入合适的化合物或药物,刺激细胞诱导凋亡。
    1.2 去除药物或化合物,以新鲜培养基洗涤细胞2-3次,更换新鲜培养基后,以1μL/mL的量加入caspase3/7检测液,使得caspase3/7检测试剂工作液浓度为1μM。(注意: Caspase3/7 检测试剂工作液浓度为0.5μM~2μM,您根据细胞量以及培养液的体积进行调整优化。)
    1.3 37℃,避光孵育30min,或室温孵育45-60min。
    1.4 荧光显微镜观察拍照或荧光光度计读数。
    使用说明 
        1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。 
        2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。 
        3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物; 
        4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;   
        5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。  
        6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。

    产品细节图片1
    Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒使用注意事项
    1. 微量试剂取用前请离心集液。
    2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
    3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
    4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
    5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
    6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
    7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
    细胞角蛋白16抗体英文全称Testosterone Recipient英文简称TR检测范围1180nmol/L-100ng/ml

    细胞分裂周期蛋白5样蛋白抗体英文全称Treponema pallidum英文简称TPI检测范围1181nmol/L-
    钙粘蛋白23抗体英文全称Recombinant Nuclear Receptor Related Protein 1英文简称NURR1检测范围1182nmol/L-20ng/ml
    细胞色素p450 2s1抗体英文全称Plasminogen activator inhibitor type 1英文简称PAIT1检测范围1183nmol/L-20ng/ml
    c-fos抗体英文全称polymeric immunoglobulin receptor英文简称PIGR检测范围1184nmol/L-40ng/ml
    6号染色体开放阅读框146抗体英文全称Netrin-4英文简称Netrin-4检测范围1185nmol/L-2000pg/ml
    6号染色体开放阅读框154抗体英文全称anti-paternal cytotoxic antibody英文简称APCA检测范围1186nmol/L-16ng/mL
    补体C5抗体英文全称Hantaan virus antibody IgM英文简称HVIgM检测范围1187nmol/L-12ng/mL
    5号染色体开放阅读框19抗体英文全称Chlamydiapneumoniae IgM英文简称CDPIgM检测范围1188nmol/L-64ng/mL
    5号染色体开放阅读框24抗体英文全称secretory carrier membrane protein 3英文简称SCAMP3检测范围1189nmol/L-2000pg/ml
    5号染色体开放阅读框35抗体英文全称Uncoupling protein 1英文简称UCP 1检测范围1190nmol/L-200ng/ml
    5号染色体开放阅读框42抗体英文全称her2-ecd英文简称her2-ecd检测范围1191nmol/L-100ng/ml
    5号染色体开放阅读框45抗体英文全称secreted frizzled-related protein 3英文简称sFRP-3检测范围1192nmol/L-40ng/ml
    5号染色体开放阅读框48抗体英文全称Protein-arginine deiminase type-2英文简称PADI2检测范围1193nmol/L-1200pg/ml
    5号染色体开放阅读框49抗体英文全称Protein-arginine deiminase type-4英文简称PADI4检测范围1194nmol/L-8ng/ml
    热休克蛋白70 单克隆抗体HSP70 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul

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