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26
- 英文名:
Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
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详见说明书
- 供应商:
上海一研
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低温
- 规格:
50次
中文名称:Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒
英文名称:Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
产品规格:50次
发货周期:1~3天
本试剂盒是一种采用Annexin-PE与7-AAD双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性,对PS有高度的亲和性。因此,该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。7-AAD是一种核酸染料,可进入死细胞内与DNA结合,能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色。7-ADD与PI有着相似的荧光特性,但其发射波谱较PI窄,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI的最佳替代品,因此通常将Annexin V-PE与ADD配合染色,以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
操作步骤:
1、细胞样品的准备:
a.对于贴壁细胞:小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞,至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时,加入前面收集的细胞培养液,吹打下所有的贴壁细胞,并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50μl左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞,小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
b.对于悬浮细胞:1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50微升左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞,小心吸除上清,可以残留约50μl左右的PBS,以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
2、用去离子水按1:3稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer+12ml去离子水)。
3、用250μl Binding Buffer重新悬浮细胞,调节其浓度为1×106/ml。
4、取 100μl 的细胞悬液于 5ml 流式管中,加入 5μl Annexin V-PE 和 10μl 7-AAD 溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加400μl PBS,流式细胞仪(FACS)分析。
Jurkat细胞用顺铂诱导凋亡后用Annexin V-PE/7AAD双染流式分析图谱
储存条件:2~8℃,避光保存
Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些:
1.显微技术:包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术:离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程:细胞培养。
注意事项:
1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶,反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,为取得良好的使用效果,*次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中,可能会导致检测试剂中出现少量沉淀,此时宜平衡至室温,并尽量溶解。如仍有残留的不溶物,可以离心去除后使用,经测试不会影响后续的检测效果。
2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。
3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法,实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。
腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体英文全称Transforming Protein RhoA英文简称RhoA检测范围805nmol/L-1000pg/ml
蛋白激酶B2英文全称Southeast Asian α-thalassemia zeta globin chains英文简称SAαZGC检测范围806nmol/L-1000ng/mL
血管生成素2抗体英文全称BK virus英文简称BKV检测范围807nmol/L-
芳香烃受体抗体英文全称BK virus IgG Antibody英文简称BKV IgG Ab检测范围808nmol/L-
β淀粉样肽(25-35)抗体英文全称ITG αⅤβ1英文简称ITG αⅤβ1检测范围809nmol/L-40ng/mL
血管紧张素I抗体英文全称Cholesterol in mice 7 alpha hydroxylase英文简称Cyp7A1检测范围810nmol/L-120U/L
肾上腺髓质素抗体(N端20肽)英文全称27-Hydroxycholesterol英文简称27-Hycl检测范围811nmol/L-20ng/mL
ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体英文全称Integrin Alpha 5英文简称ITGα5检测范围812nmol/L-20ng/mL
芳香化酶/细胞色素P450/雌激素合成酶抗体英文全称Cysticercosis cellulosae Antibody英文简称CC Ab检测范围813nmol/L-1200ng/mL
腺苷A2A受体抗体英文全称PAD2英文简称PAD2检测范围814nmol/L-100ng/mL
蛋白激酶A锚定蛋白95抗体英文全称typhoid antibody英文简称StAb检测范围815nmol/L-800ng/mL
Apollon凋亡抑制蛋白抗体英文全称cholera Antibody英文简称cholera检测范围816nmol/L-
α-连环蛋白抗体(钙粘蛋白相关蛋白)Catenin α英文全称Hepatitis A virus antibody英文简称HAV Ab检测范围817nmol/L-
自噬相关蛋白9B抗体英文全称Epidemic cerebrospinal meningitis Virus Antibody英文简称CEMV Ab检测范围818nmol/L-
自噬相关蛋白12抗体英文全称Ganglioside M3 英文简称GM3检测范围819nmol/L-8ng/mL
乳酸菌检测计数显色培养基250克乳酸菌检测计数显色培养基乳酸菌快速显色分离培养
蜡样芽孢杆菌计数显色培养基250克蜡样芽孢杆菌计数显色培养基蜡样芽孢杆菌快速显色分离培养
克雷伯氏显色培养基250克克雷伯氏显色培养基克雷伯氏菌快速显色分离培养
马丁肉汤1万毫升/袋马丁肉汤猪肺疫、牛肺疫、兔出败等疫苗及检验用
肉肝胃消化干粉培养基1万毫升/袋肉肝胃消化干粉培养基猪丹毒、牛副伤寒疫苗
链球菌培养基1万毫升/袋链球菌培养基链球菌疫苗及检验用
Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒Calyx kaki柿蒂PCR鉴定试剂盒 中文名称 卡尔曼综合症基因1抗体别 名 KAL; Adhesion molecule-like X-linked; ADMLX; Anosmin-1; HHA; KAL1; KALIG 1; KALIG1; Kallmann syndrome 1 sequence (anosmin 1); Kallmann syndrome interval gene 1; Kallmann syndrome protein; KALM; KALM_HUMAN; KMS.研究领域 神经生物学 信号转导 细胞骨架 细胞外基质蛋白分子量 predicted molecular weight: 74kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AF-6/l Afadin
Herba dendrobii石斛PCR鉴定试剂盒 中文名称 卵巢、胎盘、前列腺、睾丸蛋白22抗体别 名 ACTBL1; ovary; testis-expressed protein on chromosome 22; A26C3; Actin, beta like 1; ANKRD26 like family C, member 3; ANKRD26-like family C member 3; Cancer/testis antigen family 104, member 7; CT104.7; LA16c 3G11.6; POTE 22; POTE ankyrin domain family member H; POTE ankyrin domain family, member H; POTE-22; POTE22; POTEH; POTEH_HUMAN; Prostate; Prostate, ovary, testis expressed protein on chromosome 22; protein expressed in prostate, ovary, testis, and placenta 22; protein expressed in prostate, ovary, testis, and placenta POTE14 like.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学蛋白分子量 predicted molecular weight: 61kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ACTBL1/Ovary
Fructus quisqualis使君子PCR鉴定试剂盒 中文名称 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白7抗体别 名 ABC transporter ABCA7; ABC transporter member 7; ABCA SSN; ABCX; ATP binding cassette sub family A (ABC1) member 7; ATP binding cassette sub family A member 7; ATP binding Cassette Transporter A7;,FLJ40025; Macrophage ABC transporter; ABCA7_HUMAN.研究领域 肿瘤 心血管 神经生物学 信号转导 细胞类型标志物蛋白分子量 predicted molecular weight: 234kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ABCA7
Folium pyrrosiae石韦PCR鉴定试剂盒 中文名称 肌动蛋白样蛋白6B抗体别 名 53 kDa BRG1 associated factor B; ACL 6B; ACL6B; Actin like 6; Actin like protein 6B; Actin like protein6B; Actin related protein; Actin related protein Baf53b; actin-like 6B; Actl 6; ACTL 6B; Actl6; ACTL6 B; ACTL6B; Arp Na; ArpN a; ArpN alpha; ArpNa; ArpNalpha; Baf 53b; ACL6B_HUMAN.研究领域 神经生物学 干细胞 表观遗传学蛋白分子量 predicted molecular weight: 47kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ACL6B
Caulis polygoni multiflori首乌藤PCR鉴定试剂盒 中文名称 系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体别 名 AGS 1; AGS1; AGS-1; Aicardi Goutieres syndrome 1; ATIP; ATM and Rad3 related interacting protein; ATM and Rad3-related-interacting protein; ATR interacting protein; ATR-interacting protein; Atrip; ATRIP_HUMAN; Deoxyribonuclease III dnaQ/mutD (E. coli) like; DKFZp434J0310; DKFZp762J2115; DNase III; DRN 3; DRN3; FLJ12343; MGC20625; MGC26740; Three prime repair exonuclease 1; TREX 1; TREX1; TREX1 protein; MGC21482; 3' repair exonuclease 1; 3'-5' exonuclease TREX1.研究领域 免疫学 表观遗传学蛋白分子量 predicted molecular weight: 87kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ATRIP(152-194aa)
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文献和实验Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
产品名称 规格 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I 100tests 产品组成成分: Annexin V Binding Buffer, 10X conc (51-66121E) Annexin V-FITC (51-65874X
A general protocol for staining cell for cytometry analysis
V-FITC (Cat. No. 65874X, 65874H) or Annexin V-Biotin (Cat. Nos. 65872X, 65872H). 3. Via-Probe™ (Cat. No. 34321X): A convenient ready-to-use solution of the nucleic acid dye 7-AAD. Recommended for use in parallel with Annexin V-PE (Cat
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