细胞周期与凋亡检测试剂盒

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  • 上海一研
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  • 2025年12月03日
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      详见说明书

    • 供应商

      上海一研

    • 保存条件

      低温

    • 规格

      50次/200次/500次

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    中文名称:细胞周期与凋亡检测试剂盒
    英文名称:

    产品规格:50次/200次/500次
    发货周期:1~3天
    产品原理:本产品检测原理基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析细胞周期和凋亡。碘化丙啶是一种双链DNA染料,其嵌入双链DNA中可以产生荧光,并且荧光的强度和双链DNA的量成正比。
    在细胞周期中,G0和G1期细胞有一套染色体,G2和M期细胞有两套染色体,S期介于两者之间。经过碘化丙啶染色后,处在不同细胞周期中的细胞的荧光强度是不一样的。假定G0和G1期的细胞荧光强度为1,那么G2和M期的细胞的荧光强度为2,S期的细胞介于1和2之间。
    细胞凋亡时,由于细胞核皱缩和DNA片段化,染色时DNA片段会从打孔的细胞膜处丢失,流式细胞仪检测时,荧光强度小于1,即Sub-G1峰或者凋亡细胞峰。
    细胞凋亡也可以用流式细胞仪观察细胞光散射的变化来检测。凋亡前期,染色质皱缩,细胞密度增加,前向角光散色显著降低。凋亡后期,细胞产生凋亡小体,前向角光散射和侧向角光散色都显著降低。
    产品适用:本试剂盒可用于培养的贴壁细胞或者悬浮细胞检测,也可用于组织细胞检测。
    保存条件:-20°避光条件下,保存1年以上,4°避光条件下,可以保存2个月。

    细胞周期与凋亡检测试剂盒
    细胞周期与凋亡检测试剂盒使用注意事项
    1. 微量试剂取用前请离心集液。
    2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
    3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
    4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
    5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
    6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
    7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
    使用说明 
        1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。 
        2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。 
        3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物; 
        4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;   
        5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。  
        6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
    谷氨酰酶抗体英文全称acute Serum amyloid A英文简称A-SAA检测范围4510nmol/L-8ug/mL

    Gα gust抗体英文全称Regulator of G protein Signaling 12英文简称RGS12检测范围4511nmol/L-4000pg/mL
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    G激酶锚定蛋白1抗体英文全称Pepsin II英文简称PepsinII检测范围4523nmol/L-32ng/mL
    生长抑制和分化相关蛋白抗体英文全称growth differentiation factot 11英文简称GDF11检测范围4524nmol/L-2000pg/mL
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