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- 详细信息
- 技术资料
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27
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
50次/200次/500次
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中文名称:细胞周期与凋亡检测试剂盒
英文名称:
产品规格:50次/200次/500次
发货周期:1~3天
产品原理:本产品检测原理基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析细胞周期和凋亡。碘化丙啶是一种双链DNA染料,其嵌入双链DNA中可以产生荧光,并且荧光的强度和双链DNA的量成正比。
在细胞周期中,G0和G1期细胞有一套染色体,G2和M期细胞有两套染色体,S期介于两者之间。经过碘化丙啶染色后,处在不同细胞周期中的细胞的荧光强度是不一样的。假定G0和G1期的细胞荧光强度为1,那么G2和M期的细胞的荧光强度为2,S期的细胞介于1和2之间。
细胞凋亡时,由于细胞核皱缩和DNA片段化,染色时DNA片段会从打孔的细胞膜处丢失,流式细胞仪检测时,荧光强度小于1,即Sub-G1峰或者凋亡细胞峰。
细胞凋亡也可以用流式细胞仪观察细胞光散射的变化来检测。凋亡前期,染色质皱缩,细胞密度增加,前向角光散色显著降低。凋亡后期,细胞产生凋亡小体,前向角光散射和侧向角光散色都显著降低。
产品适用:本试剂盒可用于培养的贴壁细胞或者悬浮细胞检测,也可用于组织细胞检测。
保存条件:-20°避光条件下,保存1年以上,4°避光条件下,可以保存2个月。
细胞周期与凋亡检测试剂盒使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
谷氨酰酶抗体英文全称acute Serum amyloid A英文简称A-SAA检测范围4510nmol/L-8ug/mL
Gα gust抗体英文全称Regulator of G protein Signaling 12英文简称RGS12检测范围4511nmol/L-4000pg/mL
γ-谷氨酰转移酶轻链1抗体英文全称Alanylmerase aminopeptidase cd13英文简称ALAsaeCD13检测范围4512nmol/L-8ng/mL
G蛋白结合蛋白5抗体英文全称Eotaxin 3英文简称CCL26检测范围4513nmol/L-2000pg/mL
绒毛膜特异性转录因子GCMa抗体英文全称40 s ribosomal protein S19英文简称RPS19检测范围4514nmol/L-20ng/mL
肿瘤/睾丸抗原家族4亚型7抗体英文全称liver kidney microsome autoantibody英文简称LKM检测范围4515nmol/L-160ng/mL
神经细胞膜糖蛋白M6b英文全称Vacuolating cytotoxin A英文简称VacA检测范围4516nmol/L-2000pg/mL
FK506结合蛋白相关蛋白抗体(他克莫司相关蛋白)英文全称Pepsinogen C英文简称PGC检测范围4517nmol/L-8ng/mL
G蛋白偶联受体激酶5抗体英文全称cytokeratin fragment antigen 21-1英文简称CYFRA21-1检测范围4518nmol/L-
磷酸化糖原合酶激酶-3α抗体英文全称Histone antibody英文简称anti-Histone检测范围4519nmol/L-80ng/mL
半乳糖脑苷脂酶抗体英文全称不发说明书,仅供下单英文简称PV-Ab检测范围4520nmol/L-
葡萄糖转运蛋白10抗体英文全称pancreatic and duodenal homeobox factor 1英文简称Pdx1检测范围4521nmol/L-800pg/mL
DNA修复蛋白GIYD2抗体英文全称N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 4A1英文简称NR4A1检测范围4522nmol/L-320μg/mL
G激酶锚定蛋白1抗体英文全称Pepsin II英文简称PepsinII检测范围4523nmol/L-32ng/mL
生长抑制和分化相关蛋白抗体英文全称growth differentiation factot 11英文简称GDF11检测范围4524nmol/L-2000pg/mL
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在细胞周期中,G0和G1期细胞有一套染色体,G2和M期细胞有两套染色体,S期介于两者之间。经过碘化丙啶染色后,处在不同细胞周期中的细胞的荧光强度是不一样的。假定G0和G1期的细胞荧光强度为1,那么G2和M期的细胞的荧光强度为2,S期的细胞介于1和2之间。
细胞凋亡时,由于细胞核皱缩和DNA片段化,染色时DNA片段会从打孔的细胞膜处丢失,流式细胞仪检测时,荧光强度小于1,即Sub-G1峰或者凋亡细胞峰。
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产品适用:本试剂盒可用于培养的贴壁细胞或者悬浮细胞检测,也可用于组织细胞检测。
保存条件:-20°避光条件下,保存1年以上,4°避光条件下,可以保存2个月。
细胞周期与凋亡检测试剂盒使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
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G蛋白偶联受体激酶5抗体英文全称cytokeratin fragment antigen 21-1英文简称CYFRA21-1检测范围4518nmol/L-
磷酸化糖原合酶激酶-3α抗体英文全称Histone antibody英文简称anti-Histone检测范围4519nmol/L-80ng/mL
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DNA修复蛋白GIYD2抗体英文全称N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 4A1英文简称NR4A1检测范围4522nmol/L-320μg/mL
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