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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
20次|50次
丙二酸盐培养基10克Malonate Broth用于测定肠道细菌对丙二酸盐的利用试验
脱氧核糖核酸酶琼脂100克Dnase Agar用于细菌DNA酶检测
赖氨酸脱羧酶培养基5克Lysine Decarboxylase Medium用于细菌赖氨酸脱羧酶试验
脱羧酶对照试验培养基5克Decarboxylase Control Medium脱羧酶试验阴性对照(无氨基酸)
精氨酸双水解酶试验用培养基5克AD细菌精氨酸水解试验,用于假单胞菌属鉴别;弧菌的精氨酸试验
精氨酸葡萄糖斜面琼脂100克Arginine Dextrose Agar霍乱弧菌的复合生化试验
中文名称:Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒
英文名称:Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
产品规格:20次|50次
发货周期:1~3天
本试剂盒是用FITC标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷脂酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。一个包装的本试剂盒共可以检测20个细胞样品。
试剂盒组份:
Annexin V-FITC——————100μl
Annexin V-FITC结合液———12ml
碘化丙啶染色液——————220μl
Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷脂结合蛋白,参与细胞内的信号转导。但仅Annexin V被报道可以调控一些PKC的活性。
Annexin V选择性结合磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,简称PS)。磷脂酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面,即细胞膜外侧。磷脂酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合后可以阻断磷脂酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。
用带有绿色荧光的荧光探针FITC标记的Annexin V,即Annexin V-FITC,就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。
本试剂盒还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液,碘化丙啶可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,呈现红色荧光。对于坏死细胞,由于细胞膜的完整性已经丧失,Annexin V-FITC可以进入到细胞浆内,与位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸结合,从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。
本试剂盒的流式检测效果参考图1和图2,荧光显微镜检测效果参考图3。
1.细胞用本试剂盒染色后流式细胞仪检测细胞凋亡的效果图。Jurkat细胞未经处理(A)或用10μM喜树碱(Camptothecin)作用4小时(B)后,用本试剂盒染色,然后用流式细胞仪进行细胞的散射和荧光检测。从图中可以看出,经过凋亡诱导剂喜树碱处理后的细胞,其Annexin V-FITC染色阳性并且PI染色阴性的细胞,即凋亡细胞,明显增加(B图的右下象限),Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞,即坏死细胞,也有所增加(B图的右上象限)。图中Annexin V-FITC染色阴性PI染色阳性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B图的左上象限)出现的细胞点是许可范围内的检测误差。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
2.细胞用本试剂盒染色后流式细胞仪检测效果验证图。Jurkat细胞用10μM喜树碱(Camptothecin)作用4小时后,未经染色(A)、仅用本试剂盒中的PI进行染色(B)、仅用本试剂盒中的Annexin V-FITC进行染色(C)、用本试剂盒中的Annexin V-FITC和PI进行双染(D)。从图中可以看出,未经染色的是双阴性细胞(A),仅PI染色后出现了预期的PI染色阳性的细胞,仅Annexin V-FITC染色出现了预期的Annexin V-FITC染色阳性的细胞,Annexin V-FITC和PI双染出现了预期的仅Annexin V-FITC染色阳性的凋亡细胞和双阳性的坏死细胞。出现的非预期的细胞点完全在许可的误差范围内。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
储存条件:4℃避光,有效期6个月。
Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
载脂蛋白A2抗体英文全称Glutathione S transferases P1英文简称GSTP1检测范围295nmol/L-1600mIU/L
蛋白质水解酶英文全称Glutathione S transferases-π英文简称GSTπ检测范围296nmol/L-120ng/mL
铁调节蛋白2抗体英文全称Bone Morphogenetic Protein Receptor Ⅱ英文简称BMPR-2检测范围297nmol/L-8ng/mL
干扰素诱导蛋白AIM2抗体英文全称Oligoclonal bands英文简称OCB检测范围298nmol/L-1000ng/mL
水通道蛋白-2抗体英文全称Peroxiredoxin 4英文简称PRX4检测范围299nmol/L-80U/L
ADP核糖基化因子样11抗体英文全称fibronectin typeⅢ domain-containing protein 5英文简称FNDC5检测范围300nmol/L-400ng/mL
ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体英文全称IQ motif containing GTPase activating protein 1英文简称IQGAP1检测范围301nmol/L-16ng/mL
ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体英文全称Ribonucleotide Reductase M1英文简称RRM1检测范围302nmol/L-8ng/mL
ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体英文全称SATB1英文简称SATB1检测范围303nmol/L-800pg/mL
自噬相关蛋白10抗体英文全称Nucleolin英文简称NCL检测范围304nmol/L-16ng/mL
酰基辅酶A结合结构域蛋白6抗体英文全称Argyrophilic nucleolar organizer region proteins英文简称Ag-NORs检测范围305nmol/L-16ng/mL
氨基酰化酶1抗体英文全称Lamin A;C英文简称LMNA检测范围306nmol/L-160μg/mL
激活素受体样激酶1抗体英文全称Melanoma-associated antigen 1英文简称MAGEA1检测范围307nmol/L-8ng/mL
酰基鞘氨醇脱酰酶2抗体英文全称Trace Amine Associated Receptor 6英文简称TAAR6检测范围308nmol/L-48ng/mL
脂肪细胞特异性粘附分子抗体英文全称skeletal muscle Actinin-α英文简称sm Actinin-α检测范围309nmol/L-2400pg/mL
Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒Radix codonopsis党参PCR鉴定试剂盒 中文名称 腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗体别 名 5 AMP activated protein kinase subunit gamma 3; AMPK gamma 3 chain; AMPK gamma3; AMPKG3; Protein kinase AMP activated gamma 3 non catalytic subunit; AAKG3_HUMAN.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 神经生物学 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 激酶和磷酸酶蛋白分子量 predicted molecular weight: 54kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AMPK gamma 3
Radix angelicae sinensis当归PCR鉴定试剂盒 中文名称 腺苷单磷酸活化蛋白激酶β2抗体别 名 AMP activated protein kinase beta 2 non catalytic subunit; AMPK beta 2; AMPK beta 2 chain; PRKAB 2; Protein kinase AMP activated beta 2 non catalytic subunit.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 激酶和磷酸酶蛋白分子量 predicted molecular weight: 30kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AMPK beta 2
Fructus oryzae germinatus稻芽PCR鉴定试剂盒 中文名称 凋亡相关蛋白3抗体别 名 Apoptosis related protein 3; Apoptosis related protein APR 3; APR 3; APR3; Chromosome 2 open reading frame 28; HSPC013; p18; PRO240; ARAID_HUMAN.研究领域 细胞生物 免疫学蛋白分子量 predicted molecular weight: 22kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human APR3/C2orf28 (31-100aa)
Medulla junci灯心草PCR鉴定试剂盒 中文名称 自噬相关蛋白18抗体别 名 ATG 18; ATG18; Atg18 protein homolog; ATG18A; WD repeat domain phosphoinositide interacting 1; WD repeat domain phosphoinositide interacting protein 1; WD40 repeat protein interacting with phosphoInositides of 49kDa; WIPI 1 alpha; WIPI 1; WIPI 49; WIPI 49 kDa ; WIPI49.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 细胞凋亡 转录调节因子蛋白分子量 predicted molecular weight: 49kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse WIPI1
Fructus kochiae地肤子PCR鉴定试剂盒 中文名称 自噬相关蛋白4A抗体别 名 ATG4A is a cysteine protease required for autophagy, which cleaves the C-terminal part of either MAP1LC3, GABARAPL2 or GABARAP, allowing the liberation of form I. A subpopulation of form I is subsequently converted to a smaller form (form II). Form II, with a revealed C-terminal glycine, is considered to be the phosphatidylethanolamine (PE)-conjugated form, and has the capacity for the binding to autophagosomes.研究领域 肿瘤 免疫学 细胞凋亡 转录调节因子蛋白分子量 predicted molecular weight: 45kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ATG4A
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文献和实验【求助】Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒的使用
mmsong1987 我买了Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒,想研究某种材料的细胞毒性,看其是否会诱导细胞凋亡。之前做过MTT之类的检测,结果显示材料基本无毒性。 由于条件限制(流式细胞仪在我们学校另一个校区)不能及时进行检测,前两天进行了一次实验,是将细胞收集后拿到测试地点再进行的荧光染色处理,检测结果显示阴性对照组没有加材料处理的细胞也多处于凋亡状态,个人猜测可能跟细胞在路上耽误的时间有关(悬浮在Annexin V结合液中
膜,但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。 图Annexin V 检测细胞凋亡原理二、试剂盒组份
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
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