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SW620人结肠癌细胞

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      上海机纯实业有限公司

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      SW620人结肠癌细胞

    细胞名称:    SW620人结肠癌细胞
    种属来源:    人
    组织来源:    结肠
    疾病特征:    结直肠腺癌,来自转移淋巴结
    细胞形态:    上皮细胞样
    生长特性:    贴壁生长
    培 养 基:    L-15培养基,90%;FBS,10%。
    生长条件:    气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 
    传代方法:    1:2至1:6,每周2次。
    冻存条件:    90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存
    支原体检测:    阴性
    安全等级:    1
    应    用:    该细胞可以作为转染宿主细胞。

    STR:    
    Amelogenin: X
    CSF1PO: 13,14
    D13S317: 12
    D16S539: 9,13
    D5S818: 13
    D7S820: 8,9
    THO1: 8
    TPOX: 11
    vWA: 16

    同工酶:    
    ES-D, 1
    G6PD, B
    PEP-D, 1
    PGD, A
    PGM1, 2
    PGM3, 1

    参考文献:    
    Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871
     
    Fogh J, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 327080
     
    Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034
     
    Lelbovitz A, et al. Detection and analysis of a glucose 6-phosphate dehydrogenase phenotype B cell line contamination. J. Natl. Cancer Inst. 63: 635-645, 1979. PubMed: 288927
     
    Trainer DL, et al. Biological characterization and oncogene expression in human colorectal carcinoma cell lines. Int. J. Cancer 41: 287-296, 1988. PubMed: 3338874
     
    Leibovitz A, et al. Classification of human colorectal adenocarcinoma cell lines. Cancer Res. 36: 4562-4569, 1976. PubMed: 1000501
     
    Rodrigues NR, et al. p53 mutations in colorectal cancer. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 7555-7559, 1990. PubMed: 1699228

    特点和简介
    SW620是从一个51岁男性白人组织中分离得到。 由A.Leibovitz等从一个淋巴结建株。 细胞系主要由无绒毛的小园球细胞和双极细胞组成。 它仅合成少量癌胚抗原(CEA)且在裸鼠中有高度的致瘤性。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。

    接受后处理
    1)  收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
     
    2)  请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
     
    3)  弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。
     
    4)  如果细胞密度达80%-90%请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
     
    5)  接到细胞次日,请检查SW620人结肠癌细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
     
    培养操作
    1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
     
    2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
     
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
     
    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消 化。
         
    3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
     
    4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
     
    3)细胞冻存:待细胞生长状态良时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
     
    1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
     
    2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻存管做标识。
     
    3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储 存。记录冻存管位置以便下次拿取。

    培养注意事项
    1.收到细胞后首先观察细胞瓶是否完,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及时和我们联系。
     
    2.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。

    3.用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
     
    4.静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇合度  80%左右时正常传代。
     
    5.请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
     
    6.建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 我司 技术 部沟通交流。由于SW620人结肠癌细胞运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 

    7.该细胞仅供科研使用。

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