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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
496
- 英文名:
Reverse Transcriptase M-MLV(RNase H-)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
2000U
特别提示:包括M-MLV反转录酶(RNase H-)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:M-MLV反转录酶(RNase H-)
英文名称:Reverse Transcriptase M-MLV(RNase H-)
产品货号:RFT104
产品规格:2000U
M-MLV反转录酶(RNase H-),是一种经过改造和优化的反转录酶。和普通的M-MLV反转录酶相比,缺失了Ribonuclease H (RNase H)酶活性,不能够选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA,可以合成长片段从DNA。本产品中M-MLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl,用于体积为20微升的反转录体系时足够进行10次反转录反应。该反转录酶(RNase H-)由大肠杆菌表达。
M-MLV反转录酶(RNase H-)可以合成长达9-13kb的cDNA。该反转录酶的最适反应温度为42-45℃并且在55℃时仍然有很高活性,可以避免普通的M-MLV反转录酶(RNase H-)在37℃反应时的一些不足。
M-MLV反转录酶(RNase H-)常用于在获得总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成。合成的cDNA第一条链后续可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等。
产品组分:
M-MLV(200U/μl)——————2000U
5×RT buffer———————0.2ml
质量控制:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶,可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。
贮存液:50 mMTris, pH 8.3,100mMNaCl,1 mMEDTA,5 mMDTT, 0.1% Triton X-100 and 50% glycerol。
5×RT buffer:250 mMTris, pH 8.3 at25℃,250 mMKCl,20 mMMgCl2,50 mMDTT。
失活或抑制:70℃孵育10分钟可以导致M-MLV反转录酶(RNase H-)失活;EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚氨(polyamine)对该反转录酶(RNase H-)有抑制作用。
储存条件:-20℃。
我公司销售的M-MLV反转录酶(RNase H-)现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验50µl M-MLV Reverse Transcriptase (b) (200U/µl) 4000U 10000U RNase-free ddH2 O 1ml
一、 Riboclone M-MLV(H- ) cDNA合成技术 Promega公司的RibocloneR M-MLV(H- ) cDNA合成系统采用M-MLV反转录酶的RNase H缺失突变株取代AMV反转录酶,使合成的cDNA更长。该系统的第一链合成使用M-MLV反转录酶,cDNA第二链合成采用置换合成法,采用RNaseH和DNA聚合酶Ⅰ进行置换合成,最后用T4 DNA聚合酶切去单链末端,方法简便易行。该系统试剂
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
: 1) 第一代是AMV,它来源于禽成髓细胞瘤病毒,由于其两个游离肽键的特性,其反转录性能可以达到50-60%,但是,其具有RNase H活性,能够降解反转录反应中模板RNA,当进行较长片段的反转录时,就会造成cDNA的信息不完整。 2) 第二代是M-MLV,来源于Moloney鼠白血病病毒,它大大降低了RNase H的活性,但仅有一个游离肽键,所以反转录效率仅为30-40%,需要较大量的RNA模板,这样,与高丰度RNA的竞争会导致低丰度RNA的反转录效率更低
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